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目的：建立裸鼠恶性黑色素移植瘤模型,观察正常皮肤组织和不同时期裸鼠恶性黑色素移植瘤组织中血管内皮生长因子C和D(VEGF-C和VEGF-D)及其受体VEGFR-3的表达,并检测组织内的淋巴管密度(LVD),探讨VEGF-C和VEGF-D在恶性黑色素移植瘤组织淋巴管生成中的作用,为进一步研究肿瘤组织内是否存在淋巴管新生以及恶性黑色素瘤的淋巴道转移机制提供形态学依据。
方法：体外培养A375肿瘤细胞,将其接种于裸鼠左侧腰背部皮下,构建裸鼠恶性黑色素移植瘤模型；取正常皮肤组织、35天和55天移植瘤组织各20例,切片HE染色和S100蛋白染色确认模型建立；应用免疫组化法观察正常皮肤组织和不同时期移植瘤组织内VEGF-C、VEGF-D及其受体VEGFR-3的表达情况,用LYVE-1标记淋巴管,检测不同时期移植瘤组织的LVD,分析VEGF-C和VEGF-D与淋巴管生成之间的关系。
结果：经HE染色和S100免疫组化染色确认,成功建立了裸鼠恶性黑色素移植瘤模型。在恶性黑色素移植瘤组织中可见VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3的表达及LYVE-1阳性淋巴管,VEGF-C和VEGF-D表达于癌细胞的胞浆内,肿瘤的间质中可见少量表达。恶性黑色素移植瘤组织中VEGF-C和VEGF-D表达阳性率均高于正常皮肤组织；55天移植瘤组织中VEGF-C和VEGF-D表达阳性率高于35天移植瘤组织,55天与35天移植瘤组织中VEGF-C和VEGF-D表达阳性率差异均具有统计学意义。移植瘤组织中VEGFR-3阳性表达率与正常皮肤组织相比,差异有显著统计学意义；35天与55天移植瘤组织中VEGFR-3阳性表达率差异有统计学意义。VEGF-C和VEGF-D与VEGFR-3在恶性黑色素移植瘤组织中的表达分别显著相关。LYVE-1主要表达于正常组织和移植瘤组织淋巴管内皮细胞的细胞膜上,经计数淋巴管数量,移植瘤组织中LVD明显高正常皮肤组织,55天移植瘤组织中LVD高于35天移植瘤组织,差异有显著统计学意义。
结论：构建裸鼠恶性黑色素移植瘤模型是恶性黑色素瘤组织内淋巴管形态学研究和观察瘤组织新生淋巴管分布特点的有效手段；VEGF-C和VEGF-D及VEGFR-3在移植瘤组织中有较高的表达,说明VEGF-C和VEGF-D可能是肿瘤淋巴管生成的一个重要的因素,它们可诱导肿瘤组织中淋巴管新生,从而促进肿瘤的淋巴道转移。