论文部分内容阅读
烟蚜Myzus persicae(Sulzer)又名桃蚜,是我国各烟区烟草上的主要害虫之一,也是传播黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV)的主要媒介昆虫。以重庆烟区为例,2003年,仅烟蚜造成的直接和间接经济损失2000多万元,严重制约了重庆烟区烟叶生产。近几年来的调查研究表明,黄瓜花叶病毒(CMV)在我国烟区为害成逐年上升的趋势。本文对重庆武隆烟区烟草上的CMV病原进行了分离和鉴定,并从温度、烟草CMV病株对烟蚜种群生命参数的影响,烟草CMV病株对烟蚜体内主要解毒酶、靶标酶和水解酶以及对烟蚜体内一些能源物质的影响等几方面研究了温度、烟草CMV病株对烟蚜种群系统的作用。获得了以下主要研究结果:1武隆烟区烟草黄瓜花叶病毒病(CMV)病原的分离和鉴定利用CMV的鉴别寄主心叶烟和枯斑寄主苋色藜对烟草上的CMV进行了分离,并用鉴别寄主谱、间接ELISA和RT-PCR法对分离的CMV进行了生物学、血清学和分子鉴定,建立了CMV实验室毒源。在进行病毒鉴定时,分离出的待测病毒在普通烟、心叶烟、三生烟、K326、黄瓜和番茄上呈现花叶症状,叶片扭曲畸形、上卷并伸长呈鼠尾状;在苋色藜、昆诺藜呈现局部枯斑症状。待侧病毒样品OD>0.5,样品OD/阴性对照OD>2。提取的总RNA纯度较高,进行PCR特异扩增,成功获得了长度约为757 bp的DNA片段。这表明待测病毒为黄瓜花叶病毒(CMV)。2温度及烟草CMV病株对烟蚜生长发育的影响在19℃、22℃、25℃、28℃和31℃恒温条件下,对比研究了烟草CMV病株和健康烟株与烟蚜M.persica生长发育和繁殖的关系。研究表明,随着温度的升高,在健康烟株和烟草CMV病株叶碟饲养条件下,烟蚜的成虫寿命和世代历期都显著缩短,繁殖力减弱。19℃时烟蚜的成虫寿命和世代历期最长,31℃时最短。烟草CMV病株对烟蚜存活率和繁殖力有显著影响,与健康烟草相比,烟草CMV病株造成烟蚜成活率降低。烟蚜取食烟草CMV病株时,在19℃条件下其产仔量最大为36.9头,31℃最小为2.17头;净增殖率R0在19℃时最大,在31℃时最小;周限增长率λ和内禀增长率rm在25℃时最大,在31℃时最小;世代平均周期T在31℃时最小,在19℃时最大;种群加倍时间t在25℃时最小,在31℃时最大。研究结果说明,温度和烟草CMV病株对烟蚜的生长发育和繁殖有显著影响,25℃的健康烟草最适合烟蚜的生长。3.烟草CMV病株对烟蚜几种酶系的影响3.1烟草CMV病株对烟蚜体内CarE的影响采用微量滴度酶标板法对两种饲养条件下烟蚜CarE活性进行测定。结果显示,烟草CMV病株上饲养的烟蚜CarE比活力高于健康烟苗上饲养的烟蚜,其比活力是健康烟株上饲养的烟蚜CarE比活力的1.95倍。3.2烟草CMV病株对烟蚜体内磷酸酯酶的影响两种饲养条件下烟蚜酸性磷酸酯酶(ACP)的比活力测定结果表明,取食烟草CMV病株的烟蚜比活力较取食健康烟草的烟蚜显著减小,比值为0.71。碱性磷酸酯酶(ALP)的比活力测定结果显示,取食烟草CMV病株的烟蚜比活力较取食健康烟草的烟蚜显著减小,比值为0.56。3.3烟草CMV病株对烟蚜GSTS、SOD和CAT的影响对两种饲养条件下烟蚜GSTs、SOD和CAT活性进行测定。结果显示,在烟草CMV病株和健康烟草上饲养的烟蚜GSTs比活力分别为0.442μmol/(mg·min)和0.507μmol/(mg·min),因此,取食烟草CMV病株烟蚜GSTs的活性较低。烟草CMV病株上的烟蚜SOD活力和CAT活力明显高于健康烟草上的烟蚜,差异达显著水平。3.4烟草CMV病株对烟蚜AChE的影响对两种饲养条件下烟蚜体内的乙酰胆碱酯酶(AChE)活性进行测定,烟草CMV病株和健康烟草上饲养的烟蚜乙酰胆碱酯酶比活力分别为1.3726 OD/(min·mg pro)和1.0180 OD/(min·mg pro),差异达显著水平。结果表明,烟蚜取食烟草CMV病株后乙酰胆碱酯酶活性增强。4烟草CMV病株对烟蚜体内甘油三酯和多糖的影响烟草CMV病株和健康烟草上饲养的烟蚜体内甘油三酯的贮存量分别为86.3034±2.7341μg/头和145.5734±0.0574μg/头。经过独立样本t测验,发现两种烟蚜内甘油三酯含量差异达到了显著水平。体内多糖的贮存量差异也达到了极显著水平,取食烟草CMV病株和健康烟草的烟蚜体内多糖分别为9.0814±0.5230μg/头和6.6064±0.1344μg/头。5四种病毒抑制剂防治烟草黄瓜花叶病室内药效试验室内进行4种病毒抑制剂防治烟草黄瓜花叶病药效试验,结果表明,所选的四种药剂在接种CMV前施药防治烟草黄瓜花叶病毒病均获得较好的防效,以康凯防效最好,平均病情指数为12.32,其次为稼泰、好普和菌克毒克。接种CMV后施药防治效果差,但就防效稳定性看康凯防效最好,其它三种药剂较差。所以,建议在防治烟草CMV时应以预防为主,发病后施药防治效果不显著。