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目的
1.分析2013年~2015年间温州医科大学附属第一医院耐利福平金黄色葡萄球菌临床分离株的分布状况及其耐药特性，为临床有效控制金黄色葡萄球菌引起的感染和合理使用抗菌药物提供依据。
2.研究金黄色葡萄球菌小菌落突变体SCVs的相关表型特征，为进一步了解金黄色葡萄球菌引起的慢性感染提供基本理论和分子基础。
3.探究金黄色葡萄球菌及其小菌落突变体对利福平可能的耐药机制，为有效预防金黄色葡萄球菌对利福平耐药的产生提供理论依据。
方法
1.采用琼脂稀释法检测2013年~2015年间温州医科大学附属第一医院临床分离金黄色葡萄球菌对利福平的耐药性，并分析耐药菌株的感染分布情况，同时，检测耐利福平金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。
2.第一部分检测的利福平耐药菌株为亲本菌株进行SCVs的筛选，同时，通过菌落形态、溶血试验、血浆凝固酶实验、补偿试验等生化反应进行鉴定。
3.对SCVs菌株进行生长曲线、生物膜形成能力和毒力（大蜡螟感染模型）试验，分析与亲本菌株相比，SCVs是否发生适应性改变。
4.采用PCR方法扩增利福平耐药菌株染色体介导利福平耐药基因rpoB，测序后与数据库比对分析是否存在耐药突变。
5.检测SCVs对包括利福平在内的临床常用抗菌药物的耐药情况，与亲本菌株进行对比。提取SCVs菌株基因组检测rpoB基因，检测其与亲本菌株rpoB基因突变点是否存在差异。
结果
1.2013~2015年共计563株金黄色葡萄球菌中检测到41株利福平耐药菌株，三年耐药率分别为10.15%（13/128），7.69%（17/221）和5.14%（11/214）。41株利福平耐药菌株主要来源于痰液，占58.5%（24/41），其次为血液占9.7%（4/41），脑脊液占7.3%（3/41），粪便和引流液各占4.8%（2/41）。病区分布以ICU为主，占41.4%（17/41），其次为神经外科占9.7%（4/41），呼吸内科和消化内科各占4.8%（2/41）。
2.药敏试验结果显示41株耐利福平金黄色葡萄球菌对替加环素和利奈唑胺均为敏感，对其他临床常用抗菌药物均表现为不同程度的耐药。
3.41株耐利福平临床菌株进行SCVs筛选，由于SCVs菌株不稳定、容易回复成野生株的正常表型，本次共筛选出3株可稳定存在的SCVs菌株。
4.菌株适合度研究表明，与亲本菌株相比，SCVs生长能力有所降低；生物膜形成能力增强；大蜡螟毒力试验显示SCVs菌株的毒力降低。
5.41株耐利福平金黄色葡萄球菌中均检测到RpoB氨基酸发生替换，其中以466位和481位氨基酸替换为主。
6.对以上三对亲本菌株和SCVs菌株对利福平耐药机制的研究发现，JP1486与JP1486SCVs菌株的rpoB基因突变点存在差异，其余两对菌株突变点不存在差异。
结论
1.本院临床上耐利福平金黄色葡萄球菌的年分离率有逐渐降低的趋势，其标本来源主要是痰液，病区分布以ICU为主。
2.本研究发现与其亲本菌株相比较，SCVs会出现一定程度的适应性改变，而且不同的耐药机制可能引起不同的适应性表现。
3.耐利福平金黄色葡萄球菌的耐药机制较为单一，且对临床常用抗菌药物具有较高的耐药率。
1.分析2013年~2015年间温州医科大学附属第一医院耐利福平金黄色葡萄球菌临床分离株的分布状况及其耐药特性，为临床有效控制金黄色葡萄球菌引起的感染和合理使用抗菌药物提供依据。
2.研究金黄色葡萄球菌小菌落突变体SCVs的相关表型特征，为进一步了解金黄色葡萄球菌引起的慢性感染提供基本理论和分子基础。
3.探究金黄色葡萄球菌及其小菌落突变体对利福平可能的耐药机制，为有效预防金黄色葡萄球菌对利福平耐药的产生提供理论依据。
方法
1.采用琼脂稀释法检测2013年~2015年间温州医科大学附属第一医院临床分离金黄色葡萄球菌对利福平的耐药性，并分析耐药菌株的感染分布情况，同时，检测耐利福平金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。
2.第一部分检测的利福平耐药菌株为亲本菌株进行SCVs的筛选，同时，通过菌落形态、溶血试验、血浆凝固酶实验、补偿试验等生化反应进行鉴定。
3.对SCVs菌株进行生长曲线、生物膜形成能力和毒力（大蜡螟感染模型）试验，分析与亲本菌株相比，SCVs是否发生适应性改变。
4.采用PCR方法扩增利福平耐药菌株染色体介导利福平耐药基因rpoB，测序后与数据库比对分析是否存在耐药突变。
5.检测SCVs对包括利福平在内的临床常用抗菌药物的耐药情况，与亲本菌株进行对比。提取SCVs菌株基因组检测rpoB基因，检测其与亲本菌株rpoB基因突变点是否存在差异。
结果
1.2013~2015年共计563株金黄色葡萄球菌中检测到41株利福平耐药菌株，三年耐药率分别为10.15%（13/128），7.69%（17/221）和5.14%（11/214）。41株利福平耐药菌株主要来源于痰液，占58.5%（24/41），其次为血液占9.7%（4/41），脑脊液占7.3%（3/41），粪便和引流液各占4.8%（2/41）。病区分布以ICU为主，占41.4%（17/41），其次为神经外科占9.7%（4/41），呼吸内科和消化内科各占4.8%（2/41）。
2.药敏试验结果显示41株耐利福平金黄色葡萄球菌对替加环素和利奈唑胺均为敏感，对其他临床常用抗菌药物均表现为不同程度的耐药。
3.41株耐利福平临床菌株进行SCVs筛选，由于SCVs菌株不稳定、容易回复成野生株的正常表型，本次共筛选出3株可稳定存在的SCVs菌株。
4.菌株适合度研究表明，与亲本菌株相比，SCVs生长能力有所降低；生物膜形成能力增强；大蜡螟毒力试验显示SCVs菌株的毒力降低。
5.41株耐利福平金黄色葡萄球菌中均检测到RpoB氨基酸发生替换，其中以466位和481位氨基酸替换为主。
6.对以上三对亲本菌株和SCVs菌株对利福平耐药机制的研究发现，JP1486与JP1486SCVs菌株的rpoB基因突变点存在差异，其余两对菌株突变点不存在差异。
结论
1.本院临床上耐利福平金黄色葡萄球菌的年分离率有逐渐降低的趋势，其标本来源主要是痰液，病区分布以ICU为主。
2.本研究发现与其亲本菌株相比较，SCVs会出现一定程度的适应性改变，而且不同的耐药机制可能引起不同的适应性表现。
3.耐利福平金黄色葡萄球菌的耐药机制较为单一，且对临床常用抗菌药物具有较高的耐药率。