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弓形虫病是一种重要的人畜共患病，呈世界性分布。流行病学分析表明，人和几乎所有的温血动物均能感染弓形虫，且在不同地域或不同动物体内的弓形虫可能会发生生物学特征的差异，从而对弓形虫病的防治带来困难。本研究首次对国内外不同宿主来源的16个弓形虫分离株及强毒株RH株的棒状体蛋白16(rop16)、18(rop18)和国内外不同宿主来源的14个弓形虫分离株及强毒株RH株的微线体蛋白6(mic6)和8(mic8)的基因进行PCR扩增、克隆、测序，通过网络利用Blast进行同源性搜索，用Clustal X1.81程序对序列进行比对，然后用MEGA4.0程序的MP法、NJ法及ME法绘制种系发育树；同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行相似性、碱基组成、转换、颠换分析。结果显示，不同弓形虫分离株rop16片段大小完全一致，长度均为2124bp，共检测到126个变异位点，变异率为5.93％。不同弓形虫分离株rop18片段大小完全一致，长度均为1665bp，共检测到125个变异位点，变异率为7.51％。不同弓形虫分离株mic6片段大小完全一致，长度均为1050bp，共检测到35个变异位点，变异率为3.33％。不同弓形虫分离株mic8片段大小完全一致，长度均为2055bp，共检测到35个变异位点，变异率为1.65％。种系发育关系分析表明，rop16基因不能有效地区分弓形虫强、弱毒株，也无法区分基因型。rop18基因和mic8基因能够有效地区分弓形虫虫株的基因型，是研究弓形虫不同虫株之间的遗传变异的较好的分子标记，在研究弓形虫分子流行病学和群体遗传结构方面具有重要的意义。mic6基因虽然无法区分基因型，但正是因为这种强弱毒株间变异小，并且和国外分离株也仅存在十分微小的变异，进一步说明弓形虫MIC6是重要的疫苗候选因子，因此基于它构建的基因工程疫苗具有较好的交叉免疫保护作用。
本研究构建了pVAX—MIC6、pVAX—MIC8真核表达质粒，用PBS稀释到100mg/100μL，肌肉注射免疫BALB/c小鼠，并设立空载体pVAX1、PBS和空白(Control)对照组。初次免疫后分别于第2w和第4w加强免疫一次，测定相应的体液免疫和细胞免疫指标，并于三免后第10d，用弓形虫RH株速殖子腹腔感染BALB/c小鼠，观察其存活时间。
研究结果显示，pVAX—MIC6、pVAX—MIC8 DNA疫苗免疫BALB/c小鼠可有效地诱导产生体液免疫和细胞免疫反应，实验组小鼠存活时间明显延长，能够有效地提高BALB/c小鼠抗弓形虫感染能力，且pVAX—MIC6组免疫效果明显好于pVAX—MIC8组的免疫效果。本研究将为今后弓形虫疫苗的研制和应用提供一定的理论依据，应用前景广阔。