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研究目的:某些肿瘤细胞在缺乏谷氨酰胺(glutamine，Gln)的条件下，表现出增殖功能的缺失，称为Gln成瘾。文献上对细胞成瘾的研究着重于细胞增殖功能缺失或者细胞凋亡机制的研究。本研究通过不同条件长期培养小鼠结肠癌CT-26细胞，不但发现没有Gln细胞无法增殖，而且发现长期培养的细胞增殖会随着Gln浓度的增加呈现台阶式增殖，预处理或者培养条件的改善可以抑制台阶式增殖的幅度，有望为癌症的运动辅助治疗提供新思路。 研究方法:首先，在5％胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)，0mmol/L Gln浓度下，不同D-葡萄糖(D-glucose，Glu)浓度处理CT-26细胞，分别在处理后不同时间点，用塞唑蓝(3-(4，5)-dimethylt hiahiazo(-z-y)-3，5-di-phenytetrazoliu-mromide，MTT)比色法检测细胞的增殖情况。其次，在5％FBS，不同Glu浓度下，用不同Gln浓度(0-50 mmol/L)处理CT-26细胞，分别在处理后不同时间点，MTT比色法检测细胞的增殖情况。最后，在不同的预处理和培养条件下，采用对数取值的方法精细化上述谷氨酰胺浓度后，处理CT-26细胞，分别在处理后不同时间点，用MTT比色法检测细胞的增殖情况。 研究结果: 1、在5％ FBS，0mmol/L Gln，0-180 mmol/L Glu浓度下，CT-26细胞在1～8 d没有增殖，而对照组（4 mmol/L Gln、0mmol/L Glu）可以显著的促进CT-26细胞的增殖(P＜0.01)。 2、同一血清浓度，0 mmol/L Glu、0-50 mmol/L Gln浓度下，与其它Gln浓度相比较，5、7、23mmol/L Gln浓度，在8d、9d、10d时，持续的显著性促进CT-26细胞增殖(P＜0.05);5mmol/LGlu、0-50mmol/L Gln浓度下，与其它Gln浓度相比较，3、13 mmol/L Gln浓度，在8d、9d、10d时，持续的显著性促进CT-26细胞增殖(P＜0.05);22.5 mmol/L Glu、0-50 mmol/L Gln浓度下，与其它Gln浓度相比较，8d、9d、10d时，1mmol/L Gln浓度持续的显著性促进CT-26细胞增殖(P＜0.05);90mmol/LGlu、0-50 mmol/L Gln浓度下，与其它Gln浓度相比较，8d、9d、10 d时，5、10 mmol/L Gln浓度持续的显著性促进CT-26细胞增殖。 3、不同的预处理条件下，5％ FBS、5mmol/L Glu浓度下，0-20 mmol/L Gln长时间培养CT-26细胞，在不同的时间点，在一定的Gln浓度范围内，细胞增殖没有显著性差异，而在多个Gln浓度范围内，细胞增殖构成有显著性差异的三级平台(P＜0.05)。 4、同一预处理条件下，分别在10％FBS、22.5 mmol/L Glu浓度和10％FBS、90 mmol/L Glu浓度下，0-20mmol/L Gln长时间培养CT-26细胞，在不同时间点，在一定的Gln浓度范围内，细胞增殖没有显著性差异，而在多个Gln浓度范围内，细胞增殖构成有显著性差异的三级平台P＜0.05)。 5、预处理、培养条件的变化能够影响三级平台的递增幅度。同一培养条件下，马血清休克或者无Gln完全培养基种细胞预处理可以促进三级平台的递增幅度;同一预处理条件下，培养条件越差三级平台的递增幅度越大。 结论: 1、无Gln培养的CT-26细胞增殖功能缺失，说明CT-26细胞是一种Gln成瘾的肿瘤细胞。 2、不同Glu浓度下，0-50 mmol/L Gln培养CT-26细胞，随着Gln浓度的增加，CT-26细胞增殖活性先上升后下降。 3、不同预处理、培养条件下，0-20 mmol/L Gln长期培养CT-26细胞，随着Gln浓度的增加，CT-26细胞呈台阶式增殖。 4、预处理或者培养条件的改善，可以抑制台阶式增殖的递增幅度。