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目的:黑色素瘤是一种由黑色素细胞突变形成的恶性肿瘤,目前尚无有效的预防和治疗手段。已有研究报道n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs)能有效抑制乳腺癌、结肠癌等肿瘤的发生发展,然而n-3PUFAs能否抑制黑色素瘤生长以及其作用机制仍有待阐明。本研究通过体外和体内实验探究n-3PUFAs抗黑色素瘤的效果及其作用机制,为今后黑色素瘤的预防和辅助治疗提供科学的理论依据。
方法:将八周龄的C57BL/6野生型小鼠按体重随机分成两组,分别给予生理盐水和藻油灌胃,连续干预30天,通过皮下注射B16F10黑色素瘤细胞构建皮下植瘤模型,继续给予灌胃处理。定期观察并记录小鼠体重和肿瘤体积的变化情况。在体内实验中,通过气相色谱法分析肿瘤组织中脂肪酸的含量与构成;利用透射电镜观察自噬小体的表达情况;通过蛋白质免疫印迹技术检测肿瘤组织中相关蛋白的表达水平。在体外实验中,利用MTT法观察DHA对黑色素瘤细胞活力的影响,并通过蛋白质免疫印迹技术检测相关蛋白的表达水平。
结果:1、藻油处理组肿瘤体积明显小于对照组。
2、藻油处理能改变肿瘤组织的脂肪酸构成。与对照组相比,藻油处理组肿瘤组织中EPA、DHA和Total n-3含量增加,并且n-6/n-3PUFAs比值降低。
3、藻油处理增加肿瘤组织的炎性浸润水平。
4、蛋白质免疫印迹实验结果表明,藻油处理组肿瘤组织中,细胞凋亡(c-Caspase3、c-PARP、BAX、CHOP、FAS和FADD)、细胞焦亡(c-IL-1β和GSDMD-N)和氧化应激水平相关蛋白(P62、Nrf2、HO-1、p-p53、p-MAPKAPK-2、P-c-Jun和P-SAPK/JNK)的表达水平明显上调,而抗凋亡蛋白BCL-2和抗氧化酶GPX4下调。
5、DHA对黑色素瘤细胞活性的影响呈时间浓度依赖性。
6、DHA处理能上调黑色素瘤细胞中氧化应激相关蛋白和促凋亡相关蛋白的表达水平。
结论:在体内和体外实验中观察到藻油通过增强细胞内氧化应激水平,激活细胞凋亡途径从而抑制黑色素瘤生长。这些结果阐明了藻油的抗黑色素瘤作用,为膳食n-3PUFAs在黑色素瘤中的预防和辅助治疗提供科学依据。
方法:将八周龄的C57BL/6野生型小鼠按体重随机分成两组,分别给予生理盐水和藻油灌胃,连续干预30天,通过皮下注射B16F10黑色素瘤细胞构建皮下植瘤模型,继续给予灌胃处理。定期观察并记录小鼠体重和肿瘤体积的变化情况。在体内实验中,通过气相色谱法分析肿瘤组织中脂肪酸的含量与构成;利用透射电镜观察自噬小体的表达情况;通过蛋白质免疫印迹技术检测肿瘤组织中相关蛋白的表达水平。在体外实验中,利用MTT法观察DHA对黑色素瘤细胞活力的影响,并通过蛋白质免疫印迹技术检测相关蛋白的表达水平。
结果:1、藻油处理组肿瘤体积明显小于对照组。
2、藻油处理能改变肿瘤组织的脂肪酸构成。与对照组相比,藻油处理组肿瘤组织中EPA、DHA和Total n-3含量增加,并且n-6/n-3PUFAs比值降低。
3、藻油处理增加肿瘤组织的炎性浸润水平。
4、蛋白质免疫印迹实验结果表明,藻油处理组肿瘤组织中,细胞凋亡(c-Caspase3、c-PARP、BAX、CHOP、FAS和FADD)、细胞焦亡(c-IL-1β和GSDMD-N)和氧化应激水平相关蛋白(P62、Nrf2、HO-1、p-p53、p-MAPKAPK-2、P-c-Jun和P-SAPK/JNK)的表达水平明显上调,而抗凋亡蛋白BCL-2和抗氧化酶GPX4下调。
5、DHA对黑色素瘤细胞活性的影响呈时间浓度依赖性。
6、DHA处理能上调黑色素瘤细胞中氧化应激相关蛋白和促凋亡相关蛋白的表达水平。
结论:在体内和体外实验中观察到藻油通过增强细胞内氧化应激水平,激活细胞凋亡途径从而抑制黑色素瘤生长。这些结果阐明了藻油的抗黑色素瘤作用,为膳食n-3PUFAs在黑色素瘤中的预防和辅助治疗提供科学依据。