家蝇钠通道基因抗性突变与抗性的实验室监测

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该实验从家蝇钠离子通道中包含击倒抗性突变位点的第二相似区入手,分别获得了敏感与抗性家蝇的钠通道基因片段,通过序列分析证实了它们是钠离子通道基因片段,并且发现敏感株与抗性株在该片段的DNA序列中仅有一个核苷酸的差异,即第3040位核苷酸由敏感株中的C变为抗性株中的T,正是这一核苷酸变异导致了亮氨酸变为苯丙氨酸,从而改变了钠通道结构,产生了击倒抗性.将家蝇基因组DNA的序列与cDNA序列进行比较,还发现DNA序列比cDNA序列多出了一段插入序列,其余完全一致.为了监测家蝇的击倒抗性,我们根据敏感株与抗性株的钠离子通道基因的核苷酸差异设计了特异引物.根据PCR产物的电泳结果,观察该片段的有无即可区分敏感个体与抗性个体,这样就建立了击倒抗性分子生物学监测的方法.通过PCR监测昆虫抗药性的方法具有广泛的应用前景.
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