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目的：
研究发现ID4基因启动子区甲基化与肿瘤发生发展有关。目前关于ID4甲基化研究主要集中在实体瘤方面，有关白血病的研究尚少。本文主要探讨儿童白血病DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding 4，ID4)基因核心启动子区甲基化状态及其与ID4表达的关系。
方法：
1. ID4启动子区甲基化状态检测：
1) 采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specific polymerase chain reaction，MS-PCR)对32例初发白血病患儿骨髓、34名同期非肿瘤疾病儿童(对照组)外周血单个核细胞及白血病细胞系Jurkat和Molt4进行ID4基因启动子区甲基化状况分析。
2) DNA重亚硫酸氢钠处理后ID4基因启动子区测序，检测CpG位点胞嘧啶甲基化状况。
2. ID4基因表达检测：
1) 逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)检测ID4mRNA的表达。
2) 免疫组织化学法检测ID4蛋白的表达。
结果：
1. ID4基因启动子区在白血病细胞系Jurkat和Molt4中均呈完全甲基化状态，在初发白血病患儿中完全甲基化率(24/32，75.0％)显著高于对照组患儿(6/34，17.6％)；部分甲基化率(7/32，21.9％)低于对照组(24/34，70.6％)。二者差别均有统计学意义(P<0.001)。急性淋巴细胞白血病组与非淋巴细胞白血病组的完全甲基化率、部分甲基化率及非甲基化率差别无统计学意义(P>0.10)。
2. 测序分析结果显示：
1) 在完全甲基化状态的ID4基因核心启动子区所有CpG位点均呈甲基化状态。
2) 完全非甲基化状态的ID4基因核心启动子区所有CpG位点均呈非甲基化状态。
3) 部分白血病组非甲基化的序列中有少数CpG位点甲基化出现。
3. ID4的表达：
1) RT－PCR结果显示：Jurkat及Molt4细胞系及呈完全甲基化状态的白血病病例无ID4-mRNA表达，而部分甲基化及完全非甲基化的对照组则有表达。
2) 免疫组化结果显示：白血病组ID4蛋白表达(4/27，14.8[％])低于对照组(27/28，96.4％)，差异有显著性意义(P<0.001)。
4. 白血病ID4启动子区甲基化与ID4表达之间的关系：ID4核心启动子区完全甲基化使ID4蛋白表达缺失。
结论：
1. 白血病细胞系Jurkat、Molt4细胞中ID4核心启动子区呈完全甲基化状态，ID4基因失活，ID4mRNA及ID4蛋白表达受抑。
2. 儿童白血病多数病例中存在ID4核心启动子区完全甲基化状态，甲基化的ID4基因抑制ID4mRNA及ID4蛋白表达。
3. 白血病ID4启动子区甲基化是ID4基因沉默，从而导致ID4蛋白表达缺失的重要原因。
4. 儿童急性淋巴细胞白血病与非淋巴细胞白血病的ID4启动子区甲基化状态表达一致。