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背景：在肿瘤引起的死亡中，90％的患者是死于肿瘤的复发和转移。这都与肿瘤的隐性微转移(occult micrometasrases)及循环肿瘤细胞(circulatingtumor cells，CTC)密切相关。因此，我们要建立应用实时定量RT-PCR检测非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulation tumor cells，CTC)的方法。
方法：首先，模拟5个肺癌患者外周血，然后用实时定量RT-PCR检测模拟肺癌外周血中的Survivin、hTERT，CK-7，TTF-1，用EvaGreen检测法验证引物特异性，用Taqman探针法验证荧光PCR的敏感性和引物的扩增效率。最后应用Taqman探针法检测68例非小细胞肺癌患者，进一步证实应用实时定量PCR检测CTC的可行性，及其四基因与临床病理特征和疾病进展的关系。
结果：在68例肺癌外周血中，Survivin，hTERT，CK-7，TTF-1的敏感性分别是41.18％，61.76％，41.18％，35.29％。联合四种标志物，临床样本的敏感性是82.35％，与对照组相比有明显表达差异(p<0.05)。在与临床病理特征的关系中，TTF-1在肺腺癌患者表达率显著高于鳞癌(p=0.019)，TTF-1的过表达与患者淋巴结转移和远处转移相关(p=0.002，0.007)。此外，经过10个月的随访，我们发现Survivin，hTERT，CK-7，TTF-1过表达与疾病进展有关(p=0.003)，并且随着基因表达个数增加，疾病进展的风险增大，无疾病进展生存期变短(p=0.000)。
结论：实时定量RT-PCR检测肺癌患者外周血CTC是一种可靠的、特异的和敏感的方法。四基因联合检测CTCs可能成为晚期非小细胞肺癌患者疾病进展的预测因子。