【摘 要】
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目的 Pyroptosis是依赖于caspase-1的新的细胞死亡形式,具有很强的促炎症效应,但脑缺血再灌注损伤中是否发生pyroptosis目前还不清楚.本研究拟在模拟脑缺血再灌注的体外
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院神经内科,广州 510120
【出 处】
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广东省医师协会第五届神经内科医师大会
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目的 Pyroptosis是依赖于caspase-1的新的细胞死亡形式,具有很强的促炎症效应,但脑缺血再灌注损伤中是否发生pyroptosis目前还不清楚.本研究拟在模拟脑缺血再灌注的体外环境中观察小鼠大脑皮层神经元pyroptosis的发生情况.方法 对小鼠大脑皮层神经元进行氧葡萄糖剥夺再恢复(OGDR)处理,模拟脑缺血再灌注的体内过程.在OGDR0h、12h、24h、48h进行caspase-1与TUNEL免疫荧光共染,荧光显微镜下观察.Caspase-1及TUNEL双阳性细胞判定为发生pyroptosis,对双阳性细胞及全部细胞进行计数,计算pyroptosis细胞阳性率.正常培养的神经元作为对照组.结果 荧光显微镜下可见,随时间延长,OGDR组和对照组caspases-1红染细胞、TUNEL绿染细胞、红染与绿染重叠的细胞(pyroptosis细胞)均逐渐增多,与DAPI蓝染胞核分布一致,部分DAPI染色核碎裂；同一时间点比较,OGDR组caspase-1、TUNEL单染和双染细胞均比对照组明显增多.OGDR组0h、12h、24h、48h pyroptosis阳性率分别为1.19％、14.90％、14.68％、33.67％,对照组相应时间点的pyroptosis阳性率分别为0.83％、7.34％、6.72％、11.61％.两组相同时间点比较,12h、24h、48h均有统计学意义差异(P＜0.05).同组内不同时间点比较,0h、48h与其他时间点比较均有统计学意义差异(P＜0.05).结论 氧葡萄糖剥夺诱导神经元发生pyroptosis,而且在观察时间段内随时间延长呈逐渐增多趋势.
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