【摘 要】
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抗缪勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)为糖蛋白,属于TGF-β细胞因子家族。哺乳动物中,AMH因具有引起缪勒氏管退化和阻止雌性生殖器官的发育而得名。而硬骨鱼中,虽然都没有缪勒氏管,但是AMH及其受体基因已经在许多鱼类中被克隆出来,而且在已经克隆得到的鱼中被证实在性腺中表达,这表明了AMH基因在鱼类性别分化和性逆转方面可能起着某种作用。在得到AMH基因全长的情况下;我
【机 构】
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中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州 510275
【出 处】
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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛
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抗缪勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)为糖蛋白,属于TGF-β细胞因子家族。哺乳动物中,AMH因具有引起缪勒氏管退化和阻止雌性生殖器官的发育而得名。而硬骨鱼中,虽然都没有缪勒氏管,但是AMH及其受体基因已经在许多鱼类中被克隆出来,而且在已经克隆得到的鱼中被证实在性腺中表达,这表明了AMH基因在鱼类性别分化和性逆转方面可能起着某种作用。在得到AMH基因全长的情况下;我们利用原核表达技术对AMH基因构建了原核表达系统,优化得到了重组蛋白最佳的表达条件并成功制备重组蛋白,采用免疫学方法制备重组AMH蛋白的多克隆抗体。为进一步研究和探讨AMH及其受体AMHRII基因在性别分化和性逆转方面的潜在作用打下了基础并为后续的免疫组化实验提供抗体。结果 如下:(1)利用原核表达系统构建了斜带石斑鱼AMH的重组蛋白表达体系,同时得到了AMH重组蛋白的最佳诱导条件,利用变复性的纯化方式得到了纯度较高的重组蛋白。(2)通过重组蛋白免疫新西兰兔,获得了AMH-pET32a兔抗血清。经过ELISA和Western blot分析表明,经过实验封闭后,得到的抗原可以特异性的识别对应的抗原,并确定了抗体浓度。
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