【摘 要】
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食品安全、环境监测、疾病的诊断与治疗迫切需要先进的分析方法对痕量致病菌的存活状态进行鉴定.噬菌体是细菌的病毒，我们通过对噬菌体进行基因改造，构建了双砷染料-四半胱
【机 构】
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厦门大学化学化工学院化学生物学系,化学生物学福建省重点实验室,谱学分析与仪器教育部重点实验室,福建 厦门,361005
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食品安全、环境监测、疾病的诊断与治疗迫切需要先进的分析方法对痕量致病菌的存活状态进行鉴定.噬菌体是细菌的病毒，我们通过对噬菌体进行基因改造，构建了双砷染料-四半胱氨酸重组噬菌体体系，成功地应用于细菌的灵敏、特异检测[1].由于噬菌体只能在活菌中繁殖，而且重组的四半胱氨酸标签必须处于还原态才能与双砷染料牢固结合，因此可以利用细菌胞浆的还原环境，通过对重组噬菌体四半胱氨酸的检测实现死菌和活菌的区分[2].饮用水中致病菌E.coli O157：H7的活菌浓度达到10 cells/100 mL即可引发疾病.本课题拟以重组噬菌体 PPO1-TC 及 E.coli O157：H7 作为模型，建立痕量致病活菌的灵敏、特异、快速检测体系.通过噬菌体在活的 E.coli O157：H7 细菌内迅速扩增以及双砷染料染色等步骤，结合荧光显微技术、流式分析技术等在单个细菌水平实现 E.coli O157：H7 痕量活菌的快速、特异鉴定.该方法的确立，将为食品安全、细菌致病机理研究等提供重要的检测手段.
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