苯暴露对小鼠造血祖细胞蛋白表达谱影响的研究

• 作 者: 韦海燕;孟醒;杨文文;尹立红;张娟;浦跃朴;
• 机 构: 东南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系环境医学工程教育部重点实验室,南京
• 出 处: 中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
• 发表日期: 2015年期

　　[目的]苯是环境中普遍存在的确定人类致癌物.长期暴露能引起机体多器官毒性及贫血和血液系统恶性肿瘤如白血病等不同的疾病.本研究旨在揭示苯对C57BL/6小鼠造血祖细胞的毒性作用，并探索该过程中小鼠造血祖细胞蛋白表达谱的变化.[材料和方法]选取18只SPF级C57BL/6小鼠为研究对象，分为苯染毒组(300mg/kg)，溶剂对照组.采用皮下注射染毒，每天一次，持续染毒14天，间隔记录小鼠体重.染毒结束处死小鼠，分离小鼠骨髓细胞，用BD Aril-II流式细胞仪分选造血祖细胞(Lin-c-Kit+)，提取并定量蛋白，酶切蛋白，对肽段采用纳升流速HPLC液相系统EASY-nLC 1000进行分离，进而用Q-Exactive质谱仪(Thermo Finnigan)进行质谱分析，导入Maxquant软件进行Label-free分析.[结果]苯染毒组小鼠造血祖细胞(Lin-c-Kit+)的细胞比例与对照组比较显著降低(p＜0.05)；对小鼠造血祖细胞进行蛋白表达谱分析结果显示，以2倍差异统计，苯染毒后高表达的蛋白有85个，低表达的蛋白有216个.从蛋白的分子功能、所处的细胞位置和参与的生物过程三个方面对上述差异表达蛋白进行GO功能分析.结果显示分子功能中发生主要改变的是催化活性(37.8％)、结合活性(24.4％)和结构分子活性(18.3％)等相关的蛋白.其中发生变化的蛋白主要位于细胞结构组成(37.8％)、细胞器(24.4％)和大分子复合体(18.3％).苯暴露主要影响的生物过程是代谢途径(35.4％)和细胞过程(17.5％).[结论]研究发现苯暴露会影响小鼠正常生长，降低骨髓中造血祖细胞的数量和比例，从而抑制骨髓造血.通过GO分析发现苯暴露前后小鼠造血祖细胞蛋白表达谱的水平发生了改变，其对造血祖细胞的毒性作用机制可能与苯进入机体后代谢过程中具有催化活性和结合活性的蛋白发生改变有关.