持续加压在软骨细胞去分化改变中的作用机制

• 作 者: 朱芸;
• 机 构: 四川大学华西医院
• 出 处: 第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议
• 发表日期: 2014年期

　　目的：骨关节炎是关节外科最常见的疾病之一。多种因素导致的局部应力增加与骨关节炎的发生和发展有密切关系。应力对软骨细胞力学信号通路的调控是理解软骨细胞在局部应力增加状态下发生去分化改变的基础。对力学信号通路的了解将揭示应力在软骨细胞去分化中的作用机制,为骨关节炎的防治提供一个新的思路。本研究将兔软骨细胞放置在持续加压装置中培养,观察持续高压对兔软骨细胞形态,Ⅱ型胶原分泌,RhoA,Rock mRNA表达及软骨细胞骨架的影响,研究持续压力在软骨细胞去分化过程中所起的作用。方法：酶消化法获取兔膝关节软骨细胞。取二代软骨细胞在2MPa持续静水压下加压培养,分别在4、8、12、16、20、24、48h行倒置显微镜观察细胞大体形态,Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色,RT-PCR检测RhoA,Rock mRNA表达,激光扫描共聚焦显微镜观察软骨细胞细胞骨架微丝变化。结果：在持续高压状态下,软骨细胞形态在20h时开始出现去分化表现,细胞壁出现分支,细胞浆增多,细胞变大；随着培养时间延长,软骨细胞Ⅱ型胶原分泌减少,Ⅰ型胶原分泌增多；RhoA,Rock mRNA表达先增高后下降；激光扫描共聚焦显微镜观察软骨细胞细胞骨架微丝逐渐增粗。结论：持续静水压加压状态下行软骨细胞培养可导致软骨细胞的去分化,主要表现为Ⅱ型胶原分泌减少,Ⅰ型胶原分泌增多,软骨细胞细胞骨架微丝逐渐增粗等骨关节炎软骨细胞的表现。