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随着养猪业的不断发展,在猪生产中存在着一系列的异型生物质,这些异型生物质在猪饲料中、猪生存的环境中等多处存在,不仅危害着动物的健康和猪肉的品质,而且对人类的健康也存在着潜在的威胁.而猪组成型雄甾烷受体(pig Constitutive Active/Androstane Receptor,pgCAR)在机体的类固醇、药物、重金属和猪肉膻味物质等异型生物质的代谢过程中发挥重要作用.通过激活CAR,可以加快异型生物质代谢,减少其在脂肪组织的积累.本试验通过分子生物学与细胞生物学的试验方法,建立pgCAR激动剂的高通量筛选模型,对一系列具有CAR激动活性的生物活性物质进行筛选,以期研究开发出CAR激动剂类减少异型生物质的生物活性物质.试验首先用RT-PCR技术从猪肝脏的总RNA中扩增出pgCAR基因序列,先连接到T载体进行测序,再连接到pcDNA 3.1表达质粒上,构建成表达载体pcDNA 3.1-CAR；将合成的含有5个拷贝的pgCAR响应元件NR1 (nuclear receptor sites)和胸苷激酶启动子(TK promoter)的全基因序列连接到PGL3-promoter载体中,构建成报告质粒(NR1)5-TK-luc,其与PRL-TK报告质粒构成双荧光报告系统.用聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)转染技术将重组表达载体与报告质粒按pcDNA3.1-CAR∶(NR1) 5-TK-luc∶PRL-TK=2∶1∶1的比例共转染到HepG 2细胞株中,并向转染后的细胞中加入已知激动剂苯妥英钠进行检测,再加入待测活性化合物,通过检测荧光素酶基因的表达状况评价待测的13种化合物对pgCAR基因表达的激活与抑制.结果表明：苯妥英钠作为已知的激动剂,其对pgCAR的激活作用随药物浓度的增大而增强,其中在25μmol/L时的上升比率最高.待筛选的13种活性化合物中,靛玉红、绿原酸、维生素C、叶酸、谷甾醇、齐墩果酸、维生素E7种物质,对pgCAR基因表达有激活作用,与对照组相比,维生素C、叶酸和谷甾醇对pgCAR的激活作用差异显著,激活倍数分别为1.70、1.35和1.80；而黄芩苷、甘草苷、靛蓝、大豆异黄酮、甜菜碱和苦参碱6种物质,对pgCAR基因表达有抑制作用,且与对照组相比,甘草苷和大豆异黄酮对pgCAR的抑制作用差异极显著,其激活倍数均为0.75.结果提示：在待测的13种活性化合物中,维生素C、叶酸和谷甾醇对pgCAR的有显著的激活作用.