【摘 要】
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[研究目的]近年来,在海南辣椒病毒病调查过程中发现了一种疑似病毒感染的辣椒样品,其症状区别于辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)和辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV),由于该症状明显且在田间发生较多,欲鉴定其病原：[方法]使用马铃薯Y病毒属的兼并引物进行RT-PCR扩增,获得一条特异性的目的DNA条带后,插入到pM
【机 构】
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海南大学环境与植物保护学院,海口570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口571101
【出 处】
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2014年度中国热带作物学会遗传育种专业委员会/热带香料饮料作物专业委员会年会暨学术研讨会
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[研究目的]近年来,在海南辣椒病毒病调查过程中发现了一种疑似病毒感染的辣椒样品,其症状区别于辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)和辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV),由于该症状明显且在田间发生较多,欲鉴定其病原：[方法]使用马铃薯Y病毒属的兼并引物进行RT-PCR扩增,获得一条特异性的目的DNA条带后,插入到pMD 18-T载体上并转化Trans5α菌株,阳性克隆进行测序和NCBI blastn序列比对分析.根据比对结果设计一对以CP基因为检测靶标的特异引物,对采自海南省2个市县的27株黄灯笼辣椒病毒疑似样品提取总RNA后反转录成cDNA,进行PCR鉴定和测序,以期了解该病原物在黄灯笼辣椒上的致病株系和发病情况；[结果]利用马铃薯Y病毒属的兼并引物扩增得到一条约1700bp的特异DNA条带,经测序比对后发现该条带序列(包含部分NIb和部分CP基因)与已收录的甜椒脉斑驳病毒(Pepper veinal mottle virus,PVMV) (GenBank登录号：FM202327)序列相似性最高,达99％.利用PVMV的CP基因特异引物检测采自大田的27个黄灯笼辣椒病毒疑似样品,并以检测到的CP基因核苷酸序列构建进化树,发现海南辣椒上的PVMV与加纳寄主为小米椒(Capsicum frutescens)的PVMV病毒P株系属于同一进化簇,进一步表明该疑似病毒为PVMV；[结论]鉴定了海南辣椒上潜在危害较大的一种病毒为PVMV,黄灯笼辣椒疑似病样上PVMV的检出率高达74.07％,且均属P株系,说明该PVMV株系可能已成为海南辣椒生产上的潜在威胁.
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