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[目的]组合两个或两个以上替代方法可以一定程度上解决单个方法自身局限性,另一方面可以增加受试物毒性数据,有助于进行风险评估.本研究通过眼刺激和光毒性组合方法对多种受试物测试,探讨了两种组合方法的应用范围.[材料与方法]眼刺激测试采用CAMVA-BCOP组合方法,对60种婴幼儿洗护产品进行测试.CAMVA方法采用14天龄SPF级鸡胚,取40ul/mg不同浓度的受试物与CAM膜局部接触,37℃孵育30min后观察血管变化,判断反应程度,计算RC50值.BCOP方法取750ul受试物与新鲜牛眼角膜接触,测定经暴露前后角膜混浊度的变化,并用荧光素纳漏出量测量角膜渗透性变化,计算体外评分值(IVIS).光毒性测试采用3T3 NRU-PT和HET-PT组合方法,对27种受试物进行测试.3T3 NRU-PT以BALB/c 3T3细胞加入不同浓度受试物1h后进行UVA(+)和UVA(-)暴露,24h后用中性红摄入法测定细胞活力.计算受试物的IC50、PIF和MPE.HET-PT方法是在SPF级鸡胚加入不同浓度受试物或单一浓度配方后,暴露在UVA下,孵育24h后观察鸡胚反应.比较UVA(+)和UVA(-)条件下的鸡胚血管反应,计算体外评分.[结果]眼刺激预测中,CAMVA方法将42种样品判断为无刺激,而BCOP方法则有46种,BCOP与CAMVA对无刺激样品判断一致性为91.3％.CAMVA对14种样品判定为刺激性,与BCOP方法结果一致.只有4种样品CAMVA结果判断为弱刺激性,而BCOP结果为无刺激性.在光毒性组合方法中,3T3NRU-PT和HET-PT对10种已知光毒性的化学物质均实现正确分类.对17种防晒产品中,3T3NRU-PT方法对4种不溶物无法获得结果,另外对13种受试物结果为10种阴性、3种阳性.HET-PT方法预测结果为14种阴性,3种阳性.全部17种受试物经动物光毒性试验证实为14种为阴性、3种为阴性.[结论]本实验室建立CAMVA-BCOP组合方法用于婴幼儿洗护用品刺激性的区分,一致性较高；其中CAMVA实验对于检测无刺激性的结果更敏感,适用于温和产品的确认；而BCOP适用于区分轻到中度眼刺激的产品,适用于配方比较和优化,以及刺激机制的分析.而3T3NRU-PT与HET-PT组合方法光毒性测试,解决了细胞光毒性试验不适用于成品评价的难题,初步结论为可溶解原料的测试首选符合OECD标准的3T3 NRU-PT法,难溶解或成品的测试选择HET-PT法.