【摘 要】
：
从E.coli JM83基因组和人肝总RNA中分别扩增获得细菌碱性磷酸酶(BacterialAlkaline Phosphatase，BAP)基因和人甾体受体辅活化因子-1(Steroid Receptor Coactivator-1，SRC-1)的186个氨基酸对应的基因序列(以下简称SRC186)。用重组技术，构建BAP-SRC186-pET28a融合基因表达载体，在E.coli Rosett
【机 构】
：
浙江大学药学院药物分析教研室,生物制药教研室,杭州 310006
【出 处】
：
首届长三角科技论坛：长三角生物医药发展论坛
论文部分内容阅读
从E.coli JM83基因组和人肝总RNA中分别扩增获得细菌碱性磷酸酶(BacterialAlkaline Phosphatase，BAP)基因和人甾体受体辅活化因子-1(Steroid Receptor Coactivator-1，SRC-1)的186个氨基酸对应的基因序列(以下简称SRC186)。用重组技术，构建BAP-SRC186-pET28a融合基因表达载体，在E.coli Rosetta(DE3)中，以IPTG低温诱导表达，获得可溶性融合蛋白BAP-SRC186。表达实验结果表明，Rosetta(DE3)对该蛋白的表达能力强于BL21(DE3)，BAP的存在有利于可溶性SRC186的获得。以对硝基苯磷酸盐(P-nitrophenyl-phosphate，PNPP)为底物进行的活性测定显示，该融合蛋白的BAP比活力为0.176±0.0134 μmol/min/mg蛋白。活性表达的BAP-SRC186融合蛋白被应用于辅活化因子与核受体的相互作用研究。在利福平存在的情况下，BAP-SRC186能与孕烷X受体配体结合域(Pregnane X Receptor Ligand Binding Domain，PXRLBD)发生利福平剂量依赖性的相互作用，作用强度通过BAP的显色反应可方便地检测。BAP融合蛋白能有效应用于蛋白质相互作用研究。
其他文献
生物芯片技术是随着人类基因组计划(HGP)的进展而应运而生。随着基因组与生物芯片研究的深入进展，发现了许多重要的新基因或功能基因。然而，人们迫切需要发现这些基因、蛋白在人体组织中表达变化与功能，传统的疾病组织病理与分子病理学研究普遍存在的问题难以实现信息化时代生物医药的研究。由此，组织芯片技术这种高通量的工具也应运而生。本文介绍了组织芯片的优点，并就组织芯片在疾病研究中的应用进行浅谈。
利用Bacillus subtilis Natto进行深层发酵可制备纳豆激酶。采用发酵液离心除菌、20％～60％饱和度的硫酸铵沉淀、Superdex 75凝胶过滤层析和SP Sepharose Fast Flow离子交换层析对活性组分进行了分离提纯。结果表明经过分离纯化后，蛋白质纯度在SDS-PAGE中可得到单一条带、纯化倍数和酶活回收率分别为8.4和49％。纯化纳豆激酶的最适反应温度为55℃，在
L-D4FC((-)-β-L-2,3’-双脱氢-2,3’-双脱氧-5-氟胞苷)是目前报道中最具效力的抗病毒逆转录酶抑制剂，正处于二期临床试验中。最新临床研究结果显示，L-D4FC具有疗效高、耐药性好、抗病毒谱宽、毒副作用小等优点。该药兼具抗HBV和HIV双重活性，有可能成为最佳的抗HBV和HIV核苷类似物抑制剂。本文综述了L-D4FC的国内外研制状况、药理作用及临床应用，文献合成方法以及产业化前景
1 Carcinine (beta-alanyl histamine) is an imidazole dipeptide. The present study was designedto characterize the pharmacological effects of carcinine on histaminergic activity in the brain andon certa
A new flavonoid glycoside, Diosmetin 7-O-β-D-xylopyranosyl (1-6)-β-D-glucopyranoside namedas raddeanalin, was isolated from the extracts of the leaves ofsalix raddeana laksh.together withthree known c
目的：研析丽水畲族用药特点，丰富祖国医药宝库。方法：将走家串乡深入基层访问全市畲族民间医师、药农等医药相关内容，输入到自编的程序的计算机，建立畲族医药数据库，然后进行统计分析，归纳整理，去伪存真，总结畲族用药特点。结果：部分畲族医药独特，值得开发研究。结论：继续发掘整理提高畲族医药，为祖国的医药事业增光添彩。
从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA，其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99％)。将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的Barn HⅠ位点和Xhol Ⅰ位点，构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF。该质粒DNA与已线性化BacPAK6病毒株基因组DNA经脂质体介导共转染家蚕培养细胞BmN，在培养的贴壁细胞中挑出空斑，经过
本论文首先对光动力药物的发展历史、作用机制和应用进行了综述，对新一代光动力药物-δ-氨基乙酰丙酸在医药和农业中的应用作了详细介绍；然后，结合我们的研究工作，对δ-氨基乙酰丙酸制备方法进行了评述，重点介绍了采用基因工程菌生产δ-氨基乙酰丙酸的研究结果。
对重组细胞色素P450 BM-3基因工程菌的培养条件进行了单因素优化，确定了较佳的培养条件：接种量1％，装液量100mL/500mL，发酵培养基加入0.1mg/L FeCl3，OD578达到1.0左右时升温至42℃诱导，诱导时间为5小时。用Resource Q阴离子层析介质对菌体破胞液进行了初步的纯化，通过AKTA explorer100对其分离条件进行了优化，结果表明：0.3mol/L、0.5m
医药产业是一个关于国民健康和社会稳定的特殊产业，也是较多融人高新技术，高投入而又高回报的技术和知识密集型的产业。在新世纪、新阶段，向富民强省和“两个率先”迈进的征程中，江苏省委省政府要求该省医药产业必须发扬优势，抢抓机遇，进一步加快发展，实现2010年全省医药产业总量在2002年的基础上“双倍增”目标。现就江苏省医药产业发展情况作一汇报。