【摘 要】
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近年来PMA-qPCR技术的研究与应用已较广泛,而PMA-FISH技术也被报道应用于活性孢子的检测中,本文尝试将PMA-FISH技术应用于活性细菌的定量检测上,选取三种常见食源性致病
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近年来PMA-qPCR技术的研究与应用已较广泛,而PMA-FISH技术也被报道应用于活性孢子的检测中,本文尝试将PMA-FISH技术应用于活性细菌的定量检测上,选取三种常见食源性致病菌(E.coli0157∶H7、Salmonella enterica和Listeria monocytogenes)为研究对象,优化检测条件,并将该技术分别应用于已知活菌浓度的样品,与PMA-qPCR进行对比从而考察其应用效果.以传统的平板计数检测结果为指标,主要考察不同PMA浓度下PMA-FISH对E.coli的检测效果,结果发现,在PMA浓度为35uM条件下PMA-FISH的检测效果最好.将优化后的PMA-FISH技术应用于人工配置活菌比例分别为10％、50％以及100％的三种致病菌菌悬液中活菌的定量检测上,并与PMAqPCR技术进行对比.以50％活菌为例,PMA-FISH定量结果分别为51.0％、47.5％和49.8％,而PMA-qPCR定量结果分别为22.8％、29.3％和56.3％.作为一种新型、快速且具有特异性的检测技术,PMA-FISH的准确度更高,操作更加简便.
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