RTB的融合表达,鉴定与抗原性分析

• 作 者: 邢丽杰[1]李吉平[2]刘文森[2]罗小玲[3]王远[3]
• 机 构: 农业部食品安全监督检验测试中心 石河子 832000 军事医学科学院十一所 长春 130062
• 出 处: 2010第三届国际食品安全高峰论坛
• 发表日期: 2010年期

采用PCR法扩增出蓖麻毒素B链基因，并将其与PMD18-T克隆载体相连接，经序列分析正确后插入到表达载体PET-28a中，构建重组表达质粒pET-28a-RTB，将构建好的重组质粒转化入BL21感受态中，经IPTG于37℃诱导表达后，得到的融合表达的目的蛋白质经SDS-PAGE分析，相对分子质量约为31 000，利用Western与间接ELlSA鉴定证明，其具有抗原性，为制备RTB单克隆抗体及提高检测方法的敏感性打下基础。