【摘 要】
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根癌农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)可以将它的Ti质粒的一段T-DNA序列转化到广泛的宿主细胞并能整合到宿主染色体中.研究通过构建质粒pCAM 3300-Zeocin,将其电击转化根癌
【机 构】
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江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036
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根癌农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)可以将它的Ti质粒的一段T-DNA序列转化到广泛的宿主细胞并能整合到宿主染色体中.研究通过构建质粒pCAM 3300-Zeocin,将其电击转化根癌农杆菌.通过将含有目的质粒pCAM 3300-Zeocin的根癌农杆菌和产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)共培养,利用Zeocin抗性基因为筛选标记,实现了pCAM 3300-Zeocin对产甘油假丝酵母的转化.在研究中根据根癌农杆菌的生长特性,对转化条件进行了优化,在共培养时间为24h,细胞比例为1∶500～1 ∶ 00时最高转化率达到2个转化子/104个酵母细胞.初步建立了根癌农杆菌介导转化产甘油假丝酵母的转化方法为进一步研究产甘油假丝酵母打下基础.
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