α-硫辛酸对甲基汞所致神经元氧化损伤及钙稳态失衡的保护作用

• 作 者: 杨天瑶;徐兆发;刘巍;奉妹;李鸿鹏;郭美欣;
• 机 构: 中国医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室
• 出 处: 中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
• 发表日期: 2015年期

　　[目的]探讨α-硫辛酸(alpha-lipoic acid, α-LA)对甲基汞(methylmercury, MeHg)所致神经元氧化损伤及钙稳态失衡的保护作用.[方法]取出生后24h以内的SPF级Wistar大鼠若干,分离大脑皮质后,培养神经元.待神经元成熟后,将其分为6组,分别为对照组,α-LA对照组,10 μM MeHg染毒组及低、中、高剂量α-LA预处理组.对照组、10 μM MeHg染毒组用Neurobasal-A培养液培养,α-LA对照组用终浓度为50μM α-LA的培养液培养,低、中、高剂量α-LA预处理组分别用终浓度为12.5、25、50 μM α-LA的培养液提前干预；6h后,10 μM MeHg染毒组及低、中、高剂量α-LA预处理组均用10 μM MeHg暴露24 h.检测各组神经元的凋亡情况,ROS水平,Ca2+-ATP酶的活力,细胞内Ca2+含量,Calpain活力以及神经元内NR1、NR2A及NR2B的mRNA及蛋白表达水平.[结果]与对照组比较,10 μM MeHg染毒组的神经元凋亡率显著升高,ROS水平显著升高,Ca2+-ATP酶的活力显著降低,细胞内Ca2+含量显著升高,Calpain活力显著升高,神经元内NR1、NR2A的mRNA及蛋白表达水平均显著降低,NR2B的mRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(p＜0.05或p＜0.01),而NR2B的蛋白表达水平差异不显著；与10 μM MeHg染毒组比较,α-LA预处理组呈现剂量效应关系,随着α-LA预处理剂量的升高,神经元凋亡率显著降低,ROS水平显著降低,Ca2+-ATP酶的活力明显升高,细胞内Ca2+含量显著降低,Calpain活力显著降低,神经元内NR1、NR2A的mRNA及蛋白表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(p＜0.05或p＜0.01),而NR2B的mRNA及蛋白表达水平差异不显著；α-LA对照组与对照组相比,各项指标均无明显差异.[结论]α-LA预处理对甲基汞所致神经元氧化损伤及钙稳态失衡有一定的保护作用.