猪链球菌2型IMPDH单克隆抗体的制备及其识别表位分析

• 作 者: 周俊明[1]何孔旺[2]张雪寒[2]倪艳秀[2]陆承平[3]
• 机 构: 江苏省农科院兽医所 农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室，江苏 南京 210014；南京农业大学动物医学学院，江苏 南京 210095
• 出 处: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
• 发表日期: 2008年期

用纯化的硫氧还蛋白-IMPDH融合蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，对杂交瘤细胞及时筛选，阳性孔经4次有限稀释法克隆，成功获得1A8、1F2、2D2、2D12共4株能稳定传代并分泌抗IMPDH的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体腹水间接ELISA效价分别为100×211、100×211、100×210、100×28。经Western blot分析表明，4株单抗与硫氧还蛋白-IMPDH融合蛋白均具有特异性反应，并且通过4种基因分片段缺失表达蛋白，分析了4株单抗所识别抗原决定簇的差异性，发现3株单抗识别表位的编码基因集中在IMPDH基因片段的627bp～790bp之间，另外一株则集中在IMPDH基因片段的411bp～790bp之间。猪链球菌2型中IMPDH蛋白的单克隆抗体制备及相应表位分析为研究IMPDH蛋白的生物学活性及免疫学活性奠定了基础。