犬新孢子虫二硫氢键异构酶蛋白的表达、克隆和鉴定

• 作 者: 马利青[1]廖敏[2]HiroshiSuzuki[3]玄学南[3]
• 机 构: 青海省畜牧兽医科学院，广西 西宁 810003
• 出 处: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
• 发表日期: 2008年期

从犬新孢子虫cDNA文库筛选出一个编码犬新孢子虫二硫氢键异构酶蛋白的基因。全长基因和它的截头译本被克隆到pGEX载体，并且像融合蛋白一样表达到Escherichia coli。发现截头基因在E.coli中有高水平表达。截头蛋白用在一个用ELISA检测牛犬新孢子虫抗体的实验中。结果显示截头蛋白不能作为诊断牛犬新孢子虫的诊断抗原。另一方面，进行了一些酶活性实验。结果表明：纯化的截头蛋白展示具有类似陪护功能，可以增加从变性溶菌酶复性到自然溶菌酶的功能。同时，在本研究中评估了特异性二硫氢键异构酶抑制剂对犬新孢子虫生长的抑制效果。结果显示杆菌肽锌在0.25mM浓度时，对虫体的生长有90％的抑制效果；Tocinoic acid在1mM浓度时对虫体的生长有60％的抑制效果。结果支持犬新孢子虫二硫氢键异构酶是一个建立药物控制新孢子虫病的目的蛋白。