【摘 要】
:
从广东各发病猪场病料中分离到12株高致病性PRRSV,分别命名为GDB1~GDB12。设计一对ORF7基因的特异性引物,应用RT-PCR方法从各PRRSV病毒株中扩增出ORF7基因片段,将其分别克隆到pMD
【机 构】
:
华南农业大学 动物科学学院,广东 广州 510642
【出 处】
:
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
论文部分内容阅读
从广东各发病猪场病料中分离到12株高致病性PRRSV,分别命名为GDB1~GDB12。设计一对ORF7基因的特异性引物,应用RT-PCR方法从各PRRSV病毒株中扩增出ORF7基因片段,将其分别克隆到pMD19-T载体上,通过测序分析获得正确的序列。结果表明,12株PRRSVORF7基因长度为489bp,共编码124个氨基酸。用DNAStar软件对序列进行分析,同时与经典毒株VR-2332株、LV株、JXA1及周边国家、国内分离株进行核苷酸序列同源性比较,并绘制系统进化树。结果显示GDB1~GDB12与美洲型代表株VR-2332核苷酸序列同源性在92.2%~93.3%之间,推导氨基酸序列同源性在92.2%~93.5%之间;和欧洲型代表株LV相比,核苷酸序列同源性在55.3%~57.4%之间,推导氨基酸序列同源性在55.0%~58.1%之间。与最近国内江西、湖南、湖北等地分离的PRRSV相比,核苷酸序列同源性在98.7%~100%之间,推导氨基酸序列同源性在98.0%~100%之间。从遗传进化树上可看出,12个毒株与Henan-1、SY0608、HUN4、NX06等毒株亲缘关系较近,与CH-1a、MLVResp、VR2332等毒株亲缘关系较远。
其他文献
蓝舌病(Bluetongue,BT)是一种经吸血昆虫传播,引起反刍动物疫病的急性病毒性传染病,是世界动物卫生组织(OIE)规定的上报疾病(以前为A类传染病),我国将其列为一类动物疫病。蓝舌病
利用反向遗传学操作技术,以A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株为亲本株,采用RT-PCR技术对该病毒的8个基因片段分11段进行扩增,通过与双向转录载体pHW2000连接,转染293T和MDCK共培养
本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法,研制成PRRSV-IPMA试剂盒。对试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等
2007年6月份,某猪场爆发一起以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,临诊症状主要表现为高烧、皮肤发红、怀孕母猪流产,剖检主要特征是间质性肺炎。经过病原分离,获
选取H3N2亚型猪流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因保守序列,使用Primer Express 2.0软件设计出特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量
猪圆环病毒2型(PCV2)于1997年首先被发现,并被确认为是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的重要病原。各国学者相继对PCV2病原学进行深入研究发现,除PMWS外,PCV2感染还与母猪繁殖
根据由本实验室分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GD1株的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物。应用RT-PCR方法从已构建的pMD19-GD1-pORF7重组质粒中扩增ORF7片段。获得3
以纯化的新城疫病毒ND35毒株免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒
探讨抗CD22人源化基因工程多价微型抗体在杆状病毒表达系统中的表达。构建含有抗CD22人源化基因工程多价微型抗体基因的重组杆状病毒表达质粒pAcSG2-CH3,并在Sf9细胞中表达。
结合单链标记和基因芯片两种技术,构建可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因芯片。分别TA克隆部分禽流感病毒的M基因,H5、H7、H9亚型HA基因,N1、N2