【摘 要】
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目的：筛查非综合征型先天缺牙家系的致病基因并分析其致病机制.方法：以一个非综合征型先天缺牙家系和500个正常对照为研究对象,用改良盐析法提取外周血基因组DNA,通过对患者MSX1,PAX9,AXIN2,EDA,WNT1OA基因的PCR产物进行直接测序,寻找突变位点.用定点诱变的方法构建突变质粒,将正常与突变质粒转染293细胞系,通过realtime PCR、western blot及双萤光素酶报告
【机 构】
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口腔基础医学省部共建国家重点实验室培育基地和口腔生物医学教育部重点实验室,武汉大学口腔医学院
【出 处】
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2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛
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目的：筛查非综合征型先天缺牙家系的致病基因并分析其致病机制.方法：以一个非综合征型先天缺牙家系和500个正常对照为研究对象,用改良盐析法提取外周血基因组DNA,通过对患者MSX1,PAX9,AXIN2,EDA,WNT1OA基因的PCR产物进行直接测序,寻找突变位点.用定点诱变的方法构建突变质粒,将正常与突变质粒转染293细胞系,通过realtime PCR、western blot及双萤光素酶报告等方法分析突变对蛋白功能的影响.结果：在先天缺牙家系中发现一个新的AXIN2的错义突变(H660Y),该突变位于AXIN2的保守区域.Realtime PCR结果显示突变AXIN2在mRNA表达水平略有降低；Westernblot及双萤光素酶报告表明,突变蛋白在细胞中的表达量略有降低,但胞核蛋白中β-catenin表达水平无明显差异,Wnt信号通路激活水平无显著性差异.结论：该突变的发现扩大了AXIN2的突变谱,但AXIN2突变导致缺牙的致病机制仍需进一步研究.
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