【摘 要】
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目的：随着生活方式和饮食习惯等的改变,妊娠糖尿病的发病率逐年升高。妊娠糖尿病可显著影响子代个体发育,目前就妊娠糖尿病对子代牙齿发育的影响尚不清楚。本研究通过构建妊娠糖尿病大鼠模型,研究妊娠糖尿病对子代牙齿发育的影响及其作用机制。材料与方法：本研究通过孕鼠腹腔注射链脲佐菌素(50mg/kg体重)构建妊娠糖尿病大鼠模型,子代大鼠出生后第一天收集子代大鼠切牙唇侧颈环组织/细胞,通过Ki67(细胞增殖标记
【机 构】
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口腔再生医学国家地方联合工程实验室(四川大学) 四川大学华西口腔医学院
【出 处】
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2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛
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目的：随着生活方式和饮食习惯等的改变,妊娠糖尿病的发病率逐年升高。妊娠糖尿病可显著影响子代个体发育,目前就妊娠糖尿病对子代牙齿发育的影响尚不清楚。本研究通过构建妊娠糖尿病大鼠模型,研究妊娠糖尿病对子代牙齿发育的影响及其作用机制。材料与方法：本研究通过孕鼠腹腔注射链脲佐菌素(50mg/kg体重)构建妊娠糖尿病大鼠模型,子代大鼠出生后第一天收集子代大鼠切牙唇侧颈环组织/细胞,通过Ki67(细胞增殖标记物)免疫组织化学染色检测细胞增殖情况,定量PCR、western blot检测OCT4、NANOG的表达；通过亚硫酸盐测序检测OCT4、NANOG启动子区DNA甲基化水平；原代培养切牙唇侧颈环细胞,体外高糖干预、Ape1基因RNA干扰及APE1抑制剂E3330、DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dC干预,研究细胞在高糖干预及APE1表达或功能抑制状态下OCT4、NANNOG表达水平及其启动子去甲基化水平的改变。结果：妊娠糖尿病可导致1)子代切牙颈环细胞增殖抑制,OCT4和NANOG表达水平显著下调,DNA甲基化转移酶DNMT1表达显著上调,OCT4和NANOG启动子区DNA甲基化水平显著升高；2)子代切牙颈环细胞APE1表达明显下降,体外培养的原代切牙颈环细胞在高糖干预、APE1 RNA干扰或APE1抑制剂E3330干预可导致OCT4和NANOG表达显著下降,OCT4和NANOG启动子区甲基化水平显著上升；DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dC可有效抑制高糖或APE1沉默导致的OCT4和NANOG表达下调。结论：妊娠糖尿病可显著影响子代切牙颈环细胞的增殖和自我更新,其作用机制可能是通过APE1介导的DNA甲基化抑制OCT4和NANOG表达。
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