【摘 要】
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目的：细胞内源性免疫反应是机体抵抗外源性病毒和其他病原体的第一道防线.维甲酸诱导基因样受体(retinoic-acid-inducible gene-like receptor,RLR)是机体主要的病原识别受体之一,对识别病毒核糖核酸起着关键的作用.本研究旨在评价维甲酸诱导基因-Ⅰ(retinoic acid-inducible gene Ⅰ,RIG-Ⅰ)在诱导口腔鳞状细胞癌增殖和凋亡中的功能作用
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科 上海市口腔医学研究所
【出 处】
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2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛
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目的：细胞内源性免疫反应是机体抵抗外源性病毒和其他病原体的第一道防线.维甲酸诱导基因样受体(retinoic-acid-inducible gene-like receptor,RLR)是机体主要的病原识别受体之一,对识别病毒核糖核酸起着关键的作用.本研究旨在评价维甲酸诱导基因-Ⅰ(retinoic acid-inducible gene Ⅰ,RIG-Ⅰ)在诱导口腔鳞状细胞癌增殖和凋亡中的功能作用.方法：在口腔鳞状细胞癌细胞系中用不同剂量的5-三磷酸核糖核酸(5-triphosphate RNA,3p-RNA)活化RIG-Ⅰ基因,分别检测肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡以及炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的生成量；同时,口腔鳞状细胞癌细胞系分别经细胞核因子κB(nuclear factor-κB,NFκB)、促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)的抑制剂处理,确定低剂量3p-RNA诱导肿瘤细胞增殖的信号转导通路；并用免疫共沉淀法和小干扰RNA(siRNA)检测高剂量3p-RNA诱导肿瘤细胞凋亡的关键因子；最后分别检测两种诱导结果的过程中Akt所起到的作用.以Student t检验作为统计学方法,设定P＜O.05为有统计学差异.结果：低剂量的3p-RNA诱导低水平的干扰素和炎症细胞因子的合成,同时促进了NF-κB和Akt依赖的细胞增殖、迁移与侵袭.相较之下,高剂量的3p-RNA则诱导了强烈的内源性的凋亡并伴随Akt活化减少,这种诱导的凋亡效应并不依赖干扰素和TNFα受体的作用,但持续过表达的活化Akt能抑制这种效应.进一步的免疫共沉淀实验证实RIG-Ⅰ的半胱天冬酶激活和招募结构域(caspase activation and recruitment domain, CARD)是诱导凋亡作用所必需的结构.结论：在口腔鳞状细胞癌中,RIG-Ⅰ可以通过调节Akt激活,产生双重作用：低剂量的病毒双链RNA活化RIG-Ⅰ,促进了细胞的生长；而高剂量的病毒活化RIG-Ⅰ导致细胞凋亡.上述发现提示双链RNA介导的RIG-Ⅰ激活在口腔鳞状细胞癌的发生发展中具有潜在的关键作用.
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