【摘 要】
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目的 卷烟烟气是一种相当复杂的混合物,其中的化学成分多于8000种.卷烟烟气的不良刺激可诱导机体产生胞内活性氧(ROS),造成细胞内蛋白质、脂质和DNA损伤.在生理情况下,机体ROS的产生与清除处于平衡状态,但如果生成过多或清除不足,就会导致ROS水平升高,抗氧化防御能力下降,进而攻击机体引起氧化性损伤.在卷烟烟气诱导的多种人体病理学中,氧化应激被认为是关键的病理生理学机制,是多种疾病形成前期的重
【机 构】
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中国烟草总公司郑州烟草研究院,河南郑州450001
【出 处】
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2016(第二届)毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会暨有害结局路径(AOP)与风险评估培训会议
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目的 卷烟烟气是一种相当复杂的混合物,其中的化学成分多于8000种.卷烟烟气的不良刺激可诱导机体产生胞内活性氧(ROS),造成细胞内蛋白质、脂质和DNA损伤.在生理情况下,机体ROS的产生与清除处于平衡状态,但如果生成过多或清除不足,就会导致ROS水平升高,抗氧化防御能力下降,进而攻击机体引起氧化性损伤.在卷烟烟气诱导的多种人体病理学中,氧化应激被认为是关键的病理生理学机制,是多种疾病形成前期的重要表现.本研究的目的在于分析卷烟烟气粒相物(TPM)在体外实验中诱导人肺上皮细胞产生的以ROS为代表的氧化应激水平.方法 选取3R4F参比卷烟(美国肯塔基大学,标示焦油量为9.4 mg)为研究对象.利用RM20H转盘吸烟机,依照ISO标准规定的条件抽吸20支卷烟,通过剑桥滤片(Φ44 mm)捕集烟气粒相物,随后立即用DMSO震荡萃取TPM并溶解至10 mg/ml.将提取物过滤后保存在-20℃条件下作为母液备用.在生物安全柜内将TPM母液稀释至0,25,50,75,100 μg/ml的工作浓度.利用上述浓度的溶液对人肺癌细胞(A549)染毒9h后,分别测定细胞活力和ROS荧光强度.结果 研究结果表明,以0,25,50,75,100 μg/ml的TPM对A549细胞染毒9h后,ROS荧光强度分别是对照组细胞相比(1％ DMSO染毒,0TPM剂量)荧光强度的1.00,1.58,1.74,2.13和2.46倍.ROS荧光强度显示良好的剂量-反应关系.阳性对照组(t-BHP)显示阳性反应.结论 卷烟烟气粒相物可以诱导活细胞产生氧化应激,产生的胞内ROS水平有显著的剂量-反应关系.胞内ROS的检测可以作为一种有效的卷烟烟气诱导机体损伤的体外实验方法.
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