【摘 要】
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目的：在胚胎心脏发育早期,骨形态形成蛋白(BMP2)可诱导心脏转录因子的表达,然而其具体机制并不清楚.本课题组前期研究发现组蛋白乙酰化修饰对调控心脏特异性基因的表达至关重要.本研究探讨BMP2对心脏核心转录因子的调控作用是否通过影响组蛋白H3的乙酰化实现的.方法：通过转染AdBMP2腺病毒构建BMP2高表达的H9c2心肌细胞模型,Real-time PCR检测BMP2、心脏转录因子MEF2C、GA
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院心内科 重庆医科大学附属儿童医院儿研所
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
论文部分内容阅读
目的：在胚胎心脏发育早期,骨形态形成蛋白(BMP2)可诱导心脏转录因子的表达,然而其具体机制并不清楚.本课题组前期研究发现组蛋白乙酰化修饰对调控心脏特异性基因的表达至关重要.本研究探讨BMP2对心脏核心转录因子的调控作用是否通过影响组蛋白H3的乙酰化实现的.方法：通过转染AdBMP2腺病毒构建BMP2高表达的H9c2心肌细胞模型,Real-time PCR检测BMP2、心脏转录因子MEF2C、GATA4和Tbx5及组蛋白乙酰化酶(HATs)亚型p300和GCN5的mRNA相对表达量,Western blotting检测细胞总组蛋白H3乙酰化水平,染色质免疫共沉淀(ChIP)检测MEF2C、GATA4和Tbx5启动子区组蛋白H3乙酰化水平.比色分析法检测细胞HATs活性.结果：AdBMP2转染组细胞BMP2、MEF2C、GATA4和p300的mRNA相对表达水平明显高于对照组,而Tbx5和GCN5的表达与对照组相比没有明显的变化,AdBMP2转染组细胞总组蛋白H3乙酰化水平及HATs活性与对照组相比也明显升高.AdBMP2转染组细胞MEF2C和GATA4启动子区组蛋白H3乙酰化水平也明显高于对照组,而Tbx5启动子区则没有明显的变化.结论：BMP2对心脏转录因子MEF2C和GATA4的调控作用可能是通过影响基因启动子区组蛋白H3的乙酰化实现的.HATs亚型p300在BMP2诱导的H9c2细胞组蛋白高乙酰化中可能具有重要作用.
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目的：通过对骨髓增生异常综合征(MDS)患者Mitoferrin-1/-2和ABCB10在基因水平和蛋白水平的表达进行研究,以探讨MDS患者线粒体铁超载的原因,阐明线粒体铁代谢异常在MDS发病中的作用,为祛铁治疗MDS提供依据.方法：采用Real-time RT-PCR和Western Blot法分别测定实验组(23例成人MDS患者和8例MDS患儿)和近似健康对照组(12例成人ITP和8例儿童IT
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