龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠Notch信号通路相关基因表达的影响

来源 :第十四次中国中西医结合实验医学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zilianyy
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  目的 探讨龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠(experimentalautoimmune uveitis,EAU)大鼠Notch信号通路相关基因表达的影响.方法 Lewis大鼠用随机数字表法分为三组,即正常对照组、EAU模型组和龙胆泻肝汤干预组.EAU模型组和龙胆泻肝汤干预组大鼠首先注射等体积含光感受器间维生素A结合蛋白(interphotoreceptor retinoid- binding protein,IRBP)的乳糜液以诱导葡萄膜炎,正常对照组注射等体积的不含IRBP多肽的乳糜液.龙胆泻肝汤干预组在免疫后第一天起即按照200mg.kg-1.d-1的剂量(按临床使用剂量折算)灌胃治疗.免疫后第12天分别分离三组大鼠的脾脏和淋巴结收集CD4+ T细胞,流式细胞仪检测Th17、Treg细胞的表达水平,观察Th17/Treg比例变化趋势;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Notch1、Notch2、Notch3、Notch4基因的表达情况;ELISA方法检测Notch相关蛋白的表达水平.结果 流式细胞仪检测发现,与正常对照组相比,EAU模型组Th17表达水平明显升高,Treg表达水平下降,呈现不平衡表达;与EAU模型组相比,龙胆泻肝汤治疗组Th17细胞水平表达下降,Treg细胞水平表达升高,两者比例逐渐恢复均衡;Q-PCR检测发现龙胆泻肝汤干预组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch2、Notch4基因的表达在免疫后第12天高于对照组(P<0.01),但显著低于EAU组(P<0.01),Notch3基因在大鼠脾脏和淋巴结中未检测到表达;ELISA检测结果发现,龙胆泻肝汤组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch4在免疫后第12天高于对照组(P<0.05),但显著低于EAU组(P<0.05).结论 龙胆泻肝汤可通过下调EAU大鼠Notch 1、Notch2、Notch 4 基因的表达水平,可明显改善EAU大鼠中Th17/Treg细胞比例失衡状态,使两者比例逐渐恢复正常,从而达到治疗葡萄膜炎的目的.
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