【摘 要】
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目的：研究提取变异链球菌细胞内代谢组的最优方法.方法：离心收集对数期的变异链球菌沉淀,PBS清洗去除培养基和细胞外代谢产物后,分别以75％乙醇为提取介质于95℃水浴(热乙醇
【机 构】
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四川大学口腔疾病研究国家重点实验室
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目的：研究提取变异链球菌细胞内代谢组的最优方法.方法：离心收集对数期的变异链球菌沉淀,PBS清洗去除培养基和细胞外代谢产物后,分别以75％乙醇为提取介质于95℃水浴(热乙醇法)、50％乙腈为介质结合超声细胞破碎仪(超声法)、乙腈加玻璃珠并结合组织裂解仪(玻璃珠法)提取变异链球菌细胞内代谢组,应用高效液相色谱联合质谱仪(HPLC-MS)测定提取物中的小分子,比较三种方法的代谢组提取效果.结果：LC-MS能够有效地检测出细菌胞内代谢产物.LC-MS结果显示采用玻璃珠法提取的代谢产物数量高于其他组(P＜0.05),热乙醇法提取的代谢产物数量显著高于超声法(P＜0.05).结论：以50％乙腈介质配合玻璃珠和组织裂解仪提取变异链球菌细胞内代谢产物效果优于热乙醇法和超声法,这可能是由于热乙醇法使部分热不稳定性的细菌内代谢产物挥发,超声破碎革兰氏阳性菌效果不佳.
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