【摘 要】
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水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成熟的斜带石斑鱼进行性腺解剖,根据直径大小可初步将其未成熟的卵泡(follicle)分为5个发育时期：原始生长期(Primary growth stage,PG,～0.08 mm)
【机 构】
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中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州 510275
【出 处】
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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛
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水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成熟的斜带石斑鱼进行性腺解剖,根据直径大小可初步将其未成熟的卵泡(follicle)分为5个发育时期：原始生长期(Primary growth stage,PG,～0.08 mm)；卵黄发生前的时期(Previtellogenic stage,PV,～0.18 mm)；；卵黄积累早期(Early vitellogenic stage,EV, ～).25 mm)；卵黄积累中期(Midvitell-ogenicstage,MV,～0.35 mm)；卵黄积累完全时期(Full-grown immature stage,FG,～0.45 mm).用FG期的卵泡进行体外诱导成熟试验,发现L15培养基对于细胞的形态的维持效果最好.进一步对L15培养基进行了浓度梯度的试验,发现浓度(60％-100％)对细胞培养过程中的形态影响并无明显差异,使用100％的L15培养基进行体外诱导成熟试验.在大部分淡水鱼类和少数海水鱼类中,已有研究鉴定得出了两种主要的鱼类卵母细胞成熟诱导激素(MIH)：DHP (17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one)和20βS (17,20,21-trihydroxy-4-Pregnen-3-one),本研究使用HCG,DHP和20βs作为刺激剂进行成熟诱导试验.(1)直接单独加入HCG(10IU,100IU),DHP(100nM,300nM),20βS(100nM,300nM)不能诱导FG期卵泡成熟；(2)同时加入两种刺激剂：100IU HCG+100nM DHE 100IU HCG+100nM 20βS,100nMDHP+100nM20βS也无法诱导FG期卵泡成熟；(3)加入100IU HCG诱导1,3,6小时后再加入DHP(100nM,300nM)或20βS(100nM,300nM)也不能诱导FG期卵泡成熟.以上结果表明,斜带石斑鱼的卵母细胞成熟机制较为复杂,暂时仍无法确定其MIH是哪一种性类固醇激素,其体外诱导卵母细胞成熟技术仍须继续探索.
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