【摘 要】
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[目的]几茶酚是苯的主要代谢物之一,我们以前的研究发现儿茶酚处理24-72h的K562细胞的红系分化能力显著提高,红系相关基因的甲基化水平也有显著改变.实验观察了儿茶酚在
【机 构】
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北京航空航天大学生物与医学工程学院,北京
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]几茶酚是苯的主要代谢物之一,我们以前的研究发现儿茶酚处理24-72h的K562细胞的红系分化能力显著提高,红系相关基因的甲基化水平也有显著改变.实验观察了儿茶酚在更低浓度下长期处理是否也能促进K562细胞的红系分化,改变红系相关基因的甲基化水平.[材料和方法]K562细胞经较低浓度儿茶酚(10μM和20μM)处理1-4周,于不同时间用联苯胺染色法分析氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成情况；应用反转录PCR分析红系相关基因(包括α-、β-和γ-珠蛋白、血红素合成相关酶PBGD和ALAS2、红系转录因子GATA-1和NF-E2)的mRNA表达水平；并应用Sequenom MassARRAY分析技术定量分析红系相关基因的甲基化水平.[结果]儿茶酚长时间处理对氯化高铁血红素诱导的K562细胞的血红蛋白合成有显著的浓度和时间依赖性的促进作用,在处理3周和4周后,相对于对照组细胞,10μM儿茶酚处理K562细胞的氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成提高了25％以上,20μM儿茶酚处理K562细胞的氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成提高了45％以上.K562细胞经20 μM儿茶酚处理3周后,α-、β-和γ-珠蛋白、血红素合成相关酶PBGD和ALAS2、红系转录因子GATA-1和NF-E2的mRNA表达水平显著提高；如果经氯化高铁血红素诱导,这些基因的的mRNA表达会进一步提高.K562细胞经20μM儿茶酚处理3周后,α-珠蛋白基因的启动子和外显子1区域、γ-珠蛋白外显子1、β-珠蛋白簇远端调控区HS-2和HS-3、PBGD基因外显子1等区域的某些CpG位点甲基化水平显著降低.[结论]低浓度儿茶酚长时间处理可显著提高K562细胞的红系分化能力,并引起红系相关基因某些CpG位点甲基化水平的降低,提示DNA甲基化在儿茶酚促进红系分化中扮演重要角色.
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