以三维神经球模型研究有机磷农药毒死蜱的毒性损伤

• 作 者: 陈晓萍;顾娟;
• 机 构: 浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州310014
• 出 处: 中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
• 发表日期: 2015年期

　　[目的]活体中的细胞受到相邻组织的复杂调控,常规的细胞培养方法难以反映这种细胞间的作用,近年来受到关注的三维细胞模型能更好地模拟活体中的细胞状态.在本文中,我们以神经前体细胞建立三维神经球模型,从一个新的角度探讨有机磷农药毒死蜱的毒性作用.[方法]分离ICR小鼠胚胎14天的端脑,消化分解为单个细胞悬液,按4×105/孔接种于24孔板,以0.5％琼脂-RPIM水凝胶为培养基质,在培养基质中加入毒死蜱使其终浓度为0、5、10、20、30、50、100和200 μ M,于5％ CO.37℃孵育24 hr.以倒置显微镜观察和计数神经球形态结构,然后用75％乙醇固定,50μMPI染色,流式细胞仪检测.[结果]我们发现神经球的形态结构随毒死蜱的浓度增加而发生改变.在对照组,神经前体细胞呈圆形或椭圆形,主要聚集形成＞15个细胞的大神经球,在培养皿中均匀分布；在5、10、20、30μM浓度,毒死蜱对神经球形态结构无明显影响；在50州浓度,神经球缩小为5-15个细胞的中等球团；在100μM浓度,主要形成3-5个细胞聚集的小神经球；而当毒死蜱浓度达到200μM时,神经前体细胞不再聚集成球,完全分散为单个细胞.流式细胞术测定发现0-30μM毒死蜱剂量组神经前体细胞维持约4％的凋亡率,在50-200μM时神经前体细胞的凋亡率为7-13％,较对照组略有增加.[结论]有机磷农药毒死蜱能抑制神经前体细胞的聚集,破坏其组织构建为三维结构,这种作用伴有轻度的细胞凋亡现象.