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摘要：目的 建立高效液相色谱法（HPLC）测定长春西汀注射液中抗氧剂维生素C与焦亚硫酸钠含量的方法。
方法 采用HPLC法测定。强酸型阳离子交换柱（磺化交联的苯乙烯–二乙烯基共聚物），以0.05mol/L硫酸溶液为流动相，流速0.5ml/min，检测波长为205nm。
结果 焦亚硫酸钠和维生素C分别在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好，回收率分别为99.69%和99.28%，RSD分别为0.45%和0.59%（n=9）。
结论 建立了准确高效的焦亚硫酸钠与维生素C的HPLC测定方法，为质量标准的提高提供依据。
关键词：长春西汀注射液；抗氧剂；HPLC；维生素C；焦亚硫酸钠
长春西汀（vinpocetine，VIN）为夹竹桃科植物小曼长春花提取的吲哚类生物碱长春胺的衍生物，是一种脑循环代谢改善药，能改善大脑血液循环，促进大脑能量代谢，对预防及质量脑动脉硬化、脑出血后遗症的高血压冠心病的高粘血症有很好的疗效【1】。由于产品易被氧化，因此抗氧剂在质量标准方面担负着极其重要的作用。目前生产该品种的企业普遍采用焦亚硫酸钠和维生素C协同作为抗氧剂使用。现行国家药品标准中【2】，并未对抗氧剂进行的含量进行控制。本文研究采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定焦亚硫酸钠和维生素C的含量，为长春西汀注射液提高质量标准提供依据，为生产企业质量内控提供方法。
1 仪器与试药
岛津2010C高效液相色谱系统，包括四元低压梯度泵、自动进样器、紫外检测器、柱温箱、LC-solution工作站。
焦亚硫酸钠（药用辅料）、维生素C对照品（批号：100425-201103，含量：100%）中国食品药品检研究院；长春西汀注射液，海南某研究所中试样品（批号：20110901，20110902，20110903）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：SHODEX Sugar SH1011（7.80mm×300mm），填充剂为磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物阳离子交换树脂（H+），以0.05mol/L磷酸溶液为流动相，柱温为50℃，检测波长为205nm。
2.2溶液的配制 取供试品作为供试品溶液。
取焦亚硫酸钠和维生素C对照品各10mg，置同一10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度， 摇匀，即得。
按照处方，配制不含焦亚硫酸钠和维生素C的空白溶液。
2.3测定方法 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪。记录色谱图（图1），按外标法以峰面积计算供试品中焦亚硫酸钠和维生素C的含量。
2.4 线性关系试验 取焦亚硫酸钠对照品和维生素C对照品适量，精密称定，加流动相制成含焦亚硫酸钠和维生素C均为0.4，0.6，0.8，1.0和1.2mg/ml的溶液，按2.3项下方法测定，以峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，进行线性回归，焦亚硫酸钠的回归方程为：Y=1.00×10-6X-29130，r=1.0000，在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好；维生素C的回归方程为：Y=5.11×10-6X-29130，r=0.9999，在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好。
2.5定量限测定 取浓度0.4mg/ml溶液，加流动相逐级稀释，按2.3项下方法测定，以信噪比为10来确定焦亚硫酸钠和维生素C的定量限，经试验，焦亚硫酸钠的定量限为5μg/ml，维生素C的定量限为10μg/ml。
2.6 精密度试验 取1.0mg/ml焦亚硫酸钠和维生素C的溶液，连续进样6次，峰面积RSD为1.5%（n=6），方法精密度良好。
2.7 回收率试验
2.7.1 焦亚硫酸钠 按照处方比例称取焦亚硫酸钠及其他成分，用流动相溶解，分别配制成相当于供试品浓度80%，100%，120%的溶液各3份，作为回收率样品溶液。按2.3项下方法测定其含量，并计算回收率，结果见表1。平均回收率为99.69%，RSD（n=9）为0.45%。
2.7.2维生素C 按照处方比例称取维生素C及其他成分，用流动相溶解，分别配制成相当于供试品浓度80%，100%，120%的溶液各3份，作为回收率样品溶液。按2.3项下方法测定其含量，并计算回收率，结果见表2。平均回收率为99.28%，RSD（n=9）为0.59%。
2.8溶液稳定性试验 取1.0mg/ml混合对照品溶液，按2.3项方法测定，分别于0，2，4h进样，峰面积RSD为1.7%（n=3），对照品溶液在4h内稳定性良好。
2.9重复性试验 取同一批号样品6支，进行重复测定，焦亚硫酸钠含量的RSD为1.3%（n=6）；维生素C含量的RSD为1.5%（n=6）。
2.10 样品测定 按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.3项下方法测定，3批样品的测定结果见表3。
3 讨论
文献【3】介绍的氧化还原比色法操作复杂，结果准确度低，维生素C为较强的还原剂，也对测定结果有一定的影响。HPLC法能够高效快速的同时测定焦亚硫酸钠和维生素C的含量，而且准确度高，其他辅料对测定不存在干扰。
参考文献：
【1】国家食品药品监督管理局，国家药品标准，长春西汀注射液.
【2】阚微娜，王沪凯.高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液（9AA）中的抗氧剂的含量.中国生化药物杂志，2012，33（6）：833～836。
作者简介：陈伟玲，女，广西南宁市人，1982年出生，学历：本科，
职称：工程师，单位名称：广西万寿堂药业有限公司，
研究方向：药品生产、药品质量、药品检验等，
详细通讯地址：广西南宁市大沙田经济开发区荣光南路1号，
邮编：530219 联系电话：18507814665
方法 采用HPLC法测定。强酸型阳离子交换柱（磺化交联的苯乙烯–二乙烯基共聚物），以0.05mol/L硫酸溶液为流动相，流速0.5ml/min，检测波长为205nm。
结果 焦亚硫酸钠和维生素C分别在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好，回收率分别为99.69%和99.28%，RSD分别为0.45%和0.59%（n=9）。
结论 建立了准确高效的焦亚硫酸钠与维生素C的HPLC测定方法，为质量标准的提高提供依据。
关键词：长春西汀注射液；抗氧剂；HPLC；维生素C；焦亚硫酸钠
长春西汀（vinpocetine，VIN）为夹竹桃科植物小曼长春花提取的吲哚类生物碱长春胺的衍生物，是一种脑循环代谢改善药，能改善大脑血液循环，促进大脑能量代谢，对预防及质量脑动脉硬化、脑出血后遗症的高血压冠心病的高粘血症有很好的疗效【1】。由于产品易被氧化，因此抗氧剂在质量标准方面担负着极其重要的作用。目前生产该品种的企业普遍采用焦亚硫酸钠和维生素C协同作为抗氧剂使用。现行国家药品标准中【2】，并未对抗氧剂进行的含量进行控制。本文研究采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定焦亚硫酸钠和维生素C的含量，为长春西汀注射液提高质量标准提供依据，为生产企业质量内控提供方法。
1 仪器与试药
岛津2010C高效液相色谱系统，包括四元低压梯度泵、自动进样器、紫外检测器、柱温箱、LC-solution工作站。
焦亚硫酸钠（药用辅料）、维生素C对照品（批号：100425-201103，含量：100%）中国食品药品检研究院；长春西汀注射液，海南某研究所中试样品（批号：20110901，20110902，20110903）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：SHODEX Sugar SH1011（7.80mm×300mm），填充剂为磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物阳离子交换树脂（H+），以0.05mol/L磷酸溶液为流动相，柱温为50℃，检测波长为205nm。
2.2溶液的配制 取供试品作为供试品溶液。
取焦亚硫酸钠和维生素C对照品各10mg，置同一10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度， 摇匀，即得。
按照处方，配制不含焦亚硫酸钠和维生素C的空白溶液。
2.3测定方法 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪。记录色谱图（图1），按外标法以峰面积计算供试品中焦亚硫酸钠和维生素C的含量。
2.4 线性关系试验 取焦亚硫酸钠对照品和维生素C对照品适量，精密称定，加流动相制成含焦亚硫酸钠和维生素C均为0.4，0.6，0.8，1.0和1.2mg/ml的溶液，按2.3项下方法测定，以峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，进行线性回归，焦亚硫酸钠的回归方程为：Y=1.00×10-6X-29130，r=1.0000，在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好；维生素C的回归方程为：Y=5.11×10-6X-29130，r=0.9999，在0.4～1.2mg/ml范围内线性关系良好。
2.5定量限测定 取浓度0.4mg/ml溶液，加流动相逐级稀释，按2.3项下方法测定，以信噪比为10来确定焦亚硫酸钠和维生素C的定量限，经试验，焦亚硫酸钠的定量限为5μg/ml，维生素C的定量限为10μg/ml。
2.6 精密度试验 取1.0mg/ml焦亚硫酸钠和维生素C的溶液，连续进样6次，峰面积RSD为1.5%（n=6），方法精密度良好。
2.7 回收率试验
2.7.1 焦亚硫酸钠 按照处方比例称取焦亚硫酸钠及其他成分，用流动相溶解，分别配制成相当于供试品浓度80%，100%，120%的溶液各3份，作为回收率样品溶液。按2.3项下方法测定其含量，并计算回收率，结果见表1。平均回收率为99.69%，RSD（n=9）为0.45%。
2.7.2维生素C 按照处方比例称取维生素C及其他成分，用流动相溶解，分别配制成相当于供试品浓度80%，100%，120%的溶液各3份，作为回收率样品溶液。按2.3项下方法测定其含量，并计算回收率，结果见表2。平均回收率为99.28%，RSD（n=9）为0.59%。
2.8溶液稳定性试验 取1.0mg/ml混合对照品溶液，按2.3项方法测定，分别于0，2，4h进样，峰面积RSD为1.7%（n=3），对照品溶液在4h内稳定性良好。
2.9重复性试验 取同一批号样品6支，进行重复测定，焦亚硫酸钠含量的RSD为1.3%（n=6）；维生素C含量的RSD为1.5%（n=6）。
2.10 样品测定 按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.3项下方法测定，3批样品的测定结果见表3。
3 讨论
文献【3】介绍的氧化还原比色法操作复杂，结果准确度低，维生素C为较强的还原剂，也对测定结果有一定的影响。HPLC法能够高效快速的同时测定焦亚硫酸钠和维生素C的含量，而且准确度高，其他辅料对测定不存在干扰。
参考文献：
【1】国家食品药品监督管理局，国家药品标准，长春西汀注射液.
【2】阚微娜，王沪凯.高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液（9AA）中的抗氧剂的含量.中国生化药物杂志，2012，33（6）：833～836。
作者简介：陈伟玲，女，广西南宁市人，1982年出生，学历：本科，
职称：工程师，单位名称：广西万寿堂药业有限公司，
研究方向：药品生产、药品质量、药品检验等，
详细通讯地址：广西南宁市大沙田经济开发区荣光南路1号，
邮编：530219 联系电话：18507814665