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目的肝细胞癌组织M2亚型巨噬细胞浸润比例明显升高,且与肿瘤进展密切相关。本研究旨在探讨肝癌细胞表达B7-H3分子参与诱导巨噬细胞发生M2亚型极化的作用。方法通过B7-H3-shRNA沉默质粒转染HepG2细胞抑制B7-H3基因表达,将未转染组、空载体转染组和B7-H3-shRNA转染组HepG2细胞分别与THP-1来源巨噬细胞共培养;采用RT-PCR、蛋白质印迹法检测各组巨噬细胞亚型特征性分子mRNA、蛋白的表达水平。结果 HepG2细胞与THP-1来源巨噬细胞共培养后,M1亚型相关分子HLA-DR、iNOS、TNF-α的mRNA和蛋白水平随时间延长逐渐下降,而M2亚型相关分子Arg1、VEGF和CCL22的表达则逐渐升高,在24和48h与基线比较差异均有统计学意义,P<0.01。通过B7-H3-shRNA沉默HepG2细胞B7-H3基因后共培养48h,Arg1、VEGF和CCL22的mRNA相对表达量分别为0.77±0.09、0.52±0.08和0.41±0.06,低于空载体转染组的1.32±0.10、1.07±0.11和1.25±0.13,P<0.01;蛋白表达量分别为0.85±0.09、0.61±0.08和0.80±0.09,也明显低于空载体转染组的1.43±0.13、1.18±0.10和1.36±0.13,P<0.01。外源添加B7-H3重组蛋白后可一定程度逆转B7-H3基因沉默的作用,Arg1、VEGF和CCL22的表达升高,mRNA的相对表达量分别为1.10±0.11、0.91±0.11和1.02±0.16,P<0.01;蛋白分别为1.22±0.18、0.91±0.12和1.30±0.12,P<0.01。结论 HepG2细胞可通过B7-H3参与诱导THP-1来源巨噬细胞发生M2亚型极化,B7-H3可能是新的潜在治疗靶点。