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目的
失重可诱导血管内皮细胞形态和超微结构以及分泌、增殖、凋亡和血管生成等功能发生改变。本次试验拟从转录水平和转录后水平分析人脐静脉内皮细胞(HUVECs)p53降低的原因，进一步探讨回转模拟失重条件下血管内皮细胞自噬增强的分子机制。
方法回转模拟失重48 h后，实时荧光定量PCR检测HUVECs中p53 mRNA的变化；在应用siRNA沉默双微体2 (HDM2)及应用蛋白酶体抑制剂MG132两种条件下，分别检测回转模拟失重48 h后HUVECs中LC3、p53、p62和反映mTOR活性的磷酸化S6核糖体蛋白激酶(p70S6K)的表达；免疫荧光检测HUVECs中LC3斑点聚集情况，免疫共沉淀检测HUVECs回转模拟失重48 h后HDM2与p53之间的相互作用。
结果回转模拟失重48 h后，HUVECs中p53的mRNA水平变化不明显；沉默HDM2或者加入MG132均可逆转模拟失重导致的HUVECs p53蛋白表达量减少，LC3II/LC3I比值升高，p62及磷酸化p70S6K降低，LC3呈斑点状聚集的细胞比例升高等变化；免疫共沉淀显示，回转48 h后HUVECs HDM2与p53结合增强。
结论回转模拟失重是在转录后水平，通过促进HUVECs中的p53与HDM2结合，随后p53在26S蛋白酶体被降解，从而降低mTOR活性，使自噬水平升高。