应用荧光原位杂交和RFLP标记检测多小穗小麦新种质10-A中的黑麦染色质

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利用APAGE、荧光原位杂交技术和RFLP标记,对导入黑麦(SecalecerealeL.)多小穗等性状创制的小麦新种质10_A进行了分子标记检测。APAGE分析发现,10_A与其他1RS/1BL易位系一样,含有1RS的醇溶蛋白标记位点Gld1B3。以黑麦基因组总DNA作探针,用中国春(Triticumaestivumcv.ChineseSpring)基因组DNA作封阻,与10_A根尖细胞有丝分裂染色体进行荧光原位杂交。结果表明,黑麦的1RS易位到10_A中。用25个RFLP探针进行Southern分析,进一步发现10_A的1BS特异限制性片段发生丢失,代之以黑麦1RS的特异限制性片段,而位于其他染色体上的特异限制性片段未发生缺失。据此认为,多小穗小麦新种质10_A属于1RS/1BL易位系。同时还讨论了10_A在小麦遗传改良中的利用情况。 APAGE, fluorescence in situ hybridization and RFLP markers were used to detect the molecular marker of wheat germplasm 10_A, which was introduced into many spikelets of Secalecereale L.. APAGE analysis showed that 10_A, like other 1RS / 1BL translocations, contained a gliadin marker site of 1RS Gld1B3. The total DNA of rye genomic DNA was used as a probe, and the genome DNA of Chinese Spring (Triticum albumum Chinese Spring) was used as a probe to perform fluorescence in situ hybridization with 10 A root tip mitotic chromosome. The results showed that 1RS of rye translocated to 10_A. Southern analysis using 25 RFLP probes further revealed that the 1BS-specific restriction fragment of 10_A was lost, replaced by the specific restriction fragment of rye 1RS, while the deletion of the specific restriction fragments on other chromosomes did not occur. Therefore, the new germplasm 10_A of multi-spikelet belongs to the 1RS / 1BL translocation line. The use of 10_A in wheat genetic improvement was also discussed.
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