目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用.方法 70只兔建立下腔静脉内Dacron片植入血栓模型,随机分为pLEGFP-N1-tPA治疗组(n=30)、pLEGFP-N1空载体对照组(n=20)、空白对照组(n=20),局部基因转导,于术后2、75 d各组一半动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(confocal)观察所取静脉增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达,体视镜和电镜观察Dacron片表面血栓情况,免疫印迹(Western blot)、血浆平板和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测所取静脉tPA表达、溶栓、活性及含量变化.结果 术后2 d和75 d取材,治疗组所取静脉,confocal均观察到多而强的EGFP表达,pLEGFP-N1对照组也有EGFP表达,但空白对照组无EGFP表达.70个Dacron片加未植入组10个Dacron片共80个,在体视镜(×160倍)和电镜(×500倍)下观察,未植入组和治疗组Dacron片表面均无血栓,对照组表面均有血栓.治疗组所取静脉Western blot检测均有外源tPA表达,对照组未检测到.血浆平板显示:治疗组均有大的溶解圈,有明显溶栓作用,对照组没有;根据蚓激酶计算出的纤溶活性显示:治疗组术后2 d和75 d所取静脉tPA活性分别为(529.62±9.05)、(537.50±12.45)U/g,两时间点比较,差异无统计学意义(P＞0.05).术后2 d和75 d治疗组、两对照组中6个亚组所取静脉tPA含量分别为(A1737.64±13.19)、(B129.88±5.61)、(C128.71±5.49)、(A2742.87±10.56)、(B232.03±6.26)、(C231.34±5.63)ng/g,治疗组明显高于对照组(P＜0.01);治疗组中两时间点比较,tPA含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 pLEGFP-N1-tPA局部基因转导能有效阻止外源移植物表面血栓形成。
组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体体内靶向溶栓
【摘 要】
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目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用.方法 70只兔建立下腔静脉内Dacron片植入血栓模型,随机分为pLEGFP-N1-tPA治疗组(n=30)、pLEGFP-N1空载体对照组(n=20)、空白对照组(n=20),局部基因转导,于术后2、75 d各组一半动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(c
【机 构】
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430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,湖
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2008年25期
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