Hlrg基因定点突变体的构建及其对HepG2细胞的影响

• 作 者: 杜可军 常文辉 侯立朝 宋庆贺 刘承利 陈苏民 陈景元 柴玉
• 机 构: 第四军医大学劳动与环境卫生学教研室,陕西省疾控中心病毒室,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
• 出 处: 科学技术与工程
• 发表日期: 2006年10期
• 关键词: Hlrg基因 定点突变 HEPG2细胞 human lrg site-directed mutant HepG2 cell
• 基金项目: 国家自然科学基金(30170361,30400413,30571586),,第四军医大学博士后基金(00001149)资助

构建Hlrg基因的定点突变体,研究突变Hlrg基因表达的蛋白对HepG2细胞的影响.首先利用数据库对Hlrg基因的结构特点进行分析,在此基础上用PCR法构建Hlrg基因的定点突变体.将突变的Hlrg基因克隆到pcDNA3.1（＋）载体中,并稳定转染到HepG2细胞中.流式细胞仪和透射电镜观察突变基因表达的蛋白对HepG2细胞的影响.结果获得了针对Hlrg基因的定点突变体,亮氨酸拉链中的第二个亮氨酸被突变成丝氨酸.发现稳定表达HLrgm蛋白的HepG2细胞中出现一定比例的凋亡细胞.表明构建了Hlrg基因定点