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摘要：目的 观察不同机体状态下穴位配伍效应的变化，探究腧穴配伍对效应方向及效应量的影响。方法 选择成年SD大鼠，运用胃球囊内压测量方法，观察在胃运动正常、兴奋、抑制状态下，电针（刺激参数为3 mA，2/15 Hz）天枢组、天枢配上巨虚组、天枢配曲池组、天枢配大肠俞组（每组每种状态为10只大鼠）对调节胃运动效应的差异。结果 电针天枢单穴在3种胃运动状态下均为抑制效应（变化百分率分别为-15.83±1.80、-13.95±4.35、-21.30±2.75），兴奋状态下的效应量最高；天枢穴与曲池、上巨虚、大肠俞配伍后，其效应量均降低，3种状态3种组合的9种情况下，7种情况的效应量较单穴效应量的差异（78%）有统计学意义，提示天枢穴与不同部位腧穴的两两配伍对胃运动的调节呈现拮抗作用。结论 电针刺激不同状态下的天枢穴均呈现抑制效应，机体状态可影响效应量，并不影响效应方向；天枢穴与上肢、下肢、背部穴位配伍，对调节胃运动均呈现拮抗作用，这一作用也不受机体状态影响。
关键词：电针；天枢；腧穴配伍；胃运动；大鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.03.019
中图分类号：R245.3 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）03-0049-04
研究表明，多个腧穴配伍产生的协同、抑制或拮抗效应，对临床疗效有重要影响[1]。腧穴配伍既有协同作用也有拮抗作用，机制研究有一定进展，但在理论创新、研究设计和技术方法上有待进一步提高[2]。也有学者提出了“当多个穴位和多种针刺手法同时应用，其综合效应是不是就一定是增强，会不会产生拮抗效应”的问题[3]。一般认为，针灸的效应决定于腧穴、刺灸法和机体状态，而腧穴效应有双向性[4]、刺灸方法有补泻之别、机体状态也有虚实之分，由于这三重双向因素，决定了腧穴配伍规律研究的复杂性。最近，有研究者提出了“针刺穴位组学”概念，明确指出针刺穴位组学是用现代科学技术和创新的实验方法，以针刺常用穴位、穴对、穴位处方为研究对象，以针刺临床优势病种为研究载体，阐述针刺调节双相性、整体性等特点，验证针刺科学性，推动针刺研究进展，最终促进针刺临床应用水平提高的一门学科[5]。组学概念固然符合当前生命科学的潮流，但是以传统知识模式构建的针灸规律是否可以直接作为当代生命科学的研究对象仍是值得商榷的，没有单穴效应规律的确切描述就无法确切描述组穴的效应规律，基本的“还原论”研究可能仍然是针灸研究的基础。本课题通过对电针不同状态下天枢及其组合的效应方向及效应量分析，观察腧穴配伍效应现象，以期对认识腧穴配伍及腧穴双向性的内涵有所帮助。
1 材料与方法
1.1 动物、分组与穴位选取
健康成年清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠，体质量250～300 g，上海斯莱克实验动物有限责任公司、中国科学院上海实验动物中心提供[许可证号：SCXK（沪）2007-0005]，分批饲养于南京中医药大学清洁级动物房。实验分为正常组、阿托品组、乙酰胆碱组，每组动物数量以成功获得10只完整数据为标准。实验过程中對动物的处理措施严格遵守中华人民共和国科学技术部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》的规定和南京中医药大学有关实验动物使用的条例。穴位的选取参照《实验针灸学》[6]常用实验动物针灸穴位。
1.2 药物与仪器
20%乌拉坦（氨基甲酸乙酯，化学纯，上海青析化工科技有限公司），1.625%α-氯醛糖（Sigma，GA20288），0.1%阿托品（Sigma，A0132），0.1%乙酰胆碱（Sigma，A6625）。动物恒温手术台（ST-1型，成都仪器厂），微量注射泵（ALC-IP800，上海奥尔科特生物科技有限公司），多道生理信号采集系统（RM6240BD型，成都仪器厂），压力换能器（YPJ01，成都仪器厂），韩氏穴位神经刺激仪（LH402A，北京华卫产业开发公司），自制双极连体针（在两根针灸针的针柄分别套上直径1 mm、长度10～15 mm的PE 50聚乙烯管以使两针之间绝缘，并露出针柄的末端5～8 mm以接电针仪，把两根针用塑料胶布捆在一起，使针身全部露出，两针相隔约1 mm，针柄上端各向两侧弯30 °，以免连接的电针仪电极夹相互接触）。
1.3 手术
实验前12 h禁食、6 h禁饮，行氨基甲酸乙酯（乌拉坦） （0.8 g/kg）及α-氯醛糖（65 mg/kg）腹腔混合麻醉后，将大鼠仰卧固定于手术台上，手术及实验过程中动物体温用恒温手术台维持在约37 ℃左右。大鼠静脉插管的一端与预先装好药物的微量注射泵相连，手术前排除插管与微量注射泵内的空气，确保无悬浮气泡，然后行左颈外静脉插管及气管插管。
1.4 胃内压记录
将大鼠上腹部毛剃除，于剑突下腹正中矢状线偏左侧5 mm一字切口切开腹腔，温和的生理盐水纱布推开肝脏暴露胃幽门部及十二指肠上段。将约1 cm2的天然乳胶膜（取自避孕套前端）安置套在塑料导管一端，导管前端与乳胶膜之间留有一定空隙，在距离乳胶膜1 mm处用外科线结扎将两者固定，制成直径为5 mm的胃内留置气囊（气囊内及插管内充满双蒸水，排除气泡），作为测量胃内压的压力监测装置。在十二指肠距胃窦部5～8 mm处，避开肠壁上可见的血管，在肠系膜的对侧做一个2～3 mm左右的一字切口，回抽囊内的双蒸水，使水囊体积缩小以便将其放入胃窦部，并避免对胃造成机械性扩张。水囊留置成功后，手术切口处作荷包缝合，固定好导管，并将其另一端通过三通装置与注射器和压力换能器相连，后者将胃内压信号转换并导入生理信号采集系统。
1.5 信号采集
以上手术完成后，先通过注射器经三通装置调节胃内水囊大小，使其稳定在约1.0 kPa，待大鼠胃蠕动波稳定后开始记录，连续记录10 min胃内压作为基础值。胃内压由传感器导入压力换能器，后者将液体压力信号转变为电信号并输入RM6240BD系统。记录不到基础蠕动波时通过注射器经三通装置调节胃内水囊大小。
关键词：电针；天枢；腧穴配伍；胃运动；大鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.03.019
中图分类号：R245.3 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）03-0049-04
研究表明，多个腧穴配伍产生的协同、抑制或拮抗效应，对临床疗效有重要影响[1]。腧穴配伍既有协同作用也有拮抗作用，机制研究有一定进展，但在理论创新、研究设计和技术方法上有待进一步提高[2]。也有学者提出了“当多个穴位和多种针刺手法同时应用，其综合效应是不是就一定是增强，会不会产生拮抗效应”的问题[3]。一般认为，针灸的效应决定于腧穴、刺灸法和机体状态，而腧穴效应有双向性[4]、刺灸方法有补泻之别、机体状态也有虚实之分，由于这三重双向因素，决定了腧穴配伍规律研究的复杂性。最近，有研究者提出了“针刺穴位组学”概念，明确指出针刺穴位组学是用现代科学技术和创新的实验方法，以针刺常用穴位、穴对、穴位处方为研究对象，以针刺临床优势病种为研究载体，阐述针刺调节双相性、整体性等特点，验证针刺科学性，推动针刺研究进展，最终促进针刺临床应用水平提高的一门学科[5]。组学概念固然符合当前生命科学的潮流，但是以传统知识模式构建的针灸规律是否可以直接作为当代生命科学的研究对象仍是值得商榷的，没有单穴效应规律的确切描述就无法确切描述组穴的效应规律，基本的“还原论”研究可能仍然是针灸研究的基础。本课题通过对电针不同状态下天枢及其组合的效应方向及效应量分析，观察腧穴配伍效应现象，以期对认识腧穴配伍及腧穴双向性的内涵有所帮助。
1 材料与方法
1.1 动物、分组与穴位选取
健康成年清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠，体质量250～300 g，上海斯莱克实验动物有限责任公司、中国科学院上海实验动物中心提供[许可证号：SCXK（沪）2007-0005]，分批饲养于南京中医药大学清洁级动物房。实验分为正常组、阿托品组、乙酰胆碱组，每组动物数量以成功获得10只完整数据为标准。实验过程中對动物的处理措施严格遵守中华人民共和国科学技术部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》的规定和南京中医药大学有关实验动物使用的条例。穴位的选取参照《实验针灸学》[6]常用实验动物针灸穴位。
1.2 药物与仪器
20%乌拉坦（氨基甲酸乙酯，化学纯，上海青析化工科技有限公司），1.625%α-氯醛糖（Sigma，GA20288），0.1%阿托品（Sigma，A0132），0.1%乙酰胆碱（Sigma，A6625）。动物恒温手术台（ST-1型，成都仪器厂），微量注射泵（ALC-IP800，上海奥尔科特生物科技有限公司），多道生理信号采集系统（RM6240BD型，成都仪器厂），压力换能器（YPJ01，成都仪器厂），韩氏穴位神经刺激仪（LH402A，北京华卫产业开发公司），自制双极连体针（在两根针灸针的针柄分别套上直径1 mm、长度10～15 mm的PE 50聚乙烯管以使两针之间绝缘，并露出针柄的末端5～8 mm以接电针仪，把两根针用塑料胶布捆在一起，使针身全部露出，两针相隔约1 mm，针柄上端各向两侧弯30 °，以免连接的电针仪电极夹相互接触）。
1.3 手术
实验前12 h禁食、6 h禁饮，行氨基甲酸乙酯（乌拉坦） （0.8 g/kg）及α-氯醛糖（65 mg/kg）腹腔混合麻醉后，将大鼠仰卧固定于手术台上，手术及实验过程中动物体温用恒温手术台维持在约37 ℃左右。大鼠静脉插管的一端与预先装好药物的微量注射泵相连，手术前排除插管与微量注射泵内的空气，确保无悬浮气泡，然后行左颈外静脉插管及气管插管。
1.4 胃内压记录
将大鼠上腹部毛剃除，于剑突下腹正中矢状线偏左侧5 mm一字切口切开腹腔，温和的生理盐水纱布推开肝脏暴露胃幽门部及十二指肠上段。将约1 cm2的天然乳胶膜（取自避孕套前端）安置套在塑料导管一端，导管前端与乳胶膜之间留有一定空隙，在距离乳胶膜1 mm处用外科线结扎将两者固定，制成直径为5 mm的胃内留置气囊（气囊内及插管内充满双蒸水，排除气泡），作为测量胃内压的压力监测装置。在十二指肠距胃窦部5～8 mm处，避开肠壁上可见的血管，在肠系膜的对侧做一个2～3 mm左右的一字切口，回抽囊内的双蒸水，使水囊体积缩小以便将其放入胃窦部，并避免对胃造成机械性扩张。水囊留置成功后，手术切口处作荷包缝合，固定好导管，并将其另一端通过三通装置与注射器和压力换能器相连，后者将胃内压信号转换并导入生理信号采集系统。
1.5 信号采集
以上手术完成后，先通过注射器经三通装置调节胃内水囊大小，使其稳定在约1.0 kPa，待大鼠胃蠕动波稳定后开始记录，连续记录10 min胃内压作为基础值。胃内压由传感器导入压力换能器，后者将液体压力信号转变为电信号并输入RM6240BD系统。记录不到基础蠕动波时通过注射器经三通装置调节胃内水囊大小。