大鼠脑内阿片受体的溶脱及稀释对其结合活性的影响

来源 :药学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangzhenyu86
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用氚标记依托菲(~3H-etor)或氚标记二苯羟乙酸喹咛酯(~3H-QNB)与大鼠脑(去小脑)P_2膜制备共同保温后,以Triton x-100溶脱,再用Sepharose 6 B层析,阿片受体及M胆碱受体洗脱峰位置相同,分子量皆约为450,000。以CHAPS溶脱P_2制备,可获得有活性的阿片及M胆碱受体。溶脱液被Tris缓冲液(50 mM,pH 7.5)稀释后,阿片受体结合能力可提高25倍,如稀释液中含CHAPS(1 mM)结合能力变化不大。 Triton x-100 was eluted with tritium-labeled etoposide (~ 3H-etor) or tritium-labeled quinacridone (~ 3H-QNB) and rat brain Sepharose 6 B chromatography, opioid receptor and M choline receptor eluting peak at the same molecular weight of about 450,000. With CHAPS stripping P_2 preparation, available active opioid and M choline receptors. After dilution of the eluate in Tris buffer (50 mM, pH 7.5), the opioid receptor binding capacity can be increased by a factor of 25, with little change in binding capacity for dilutions containing CHAPS (1 mM).
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