【摘 要】
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目的 探究氮网球花定碱盐酸盐(NMHC)抑制活化T细胞增殖的作用机制.方法 Ficoll法提取分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠法纯化出PBMC中的T细胞,抗人CD3/CD28抗体活
【机 构】
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成都医学院 药学院,四川 成都 610500;成都医学院 临床医学院,四川 成都 610500;成都医学院 检验医学院,四川 成都 610500;成都医学院 科研实验中心,四川 成都 610500
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目的 探究氮网球花定碱盐酸盐(NMHC)抑制活化T细胞增殖的作用机制.方法 Ficoll法提取分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠法纯化出PBMC中的T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化纯化后的静息T细胞.NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L-1与静息T细胞作用,用流式细胞术检测细胞毒性(96 h)、活化T细胞增殖(96 h)、T细胞表面活化标志CD25表达(24 h)和活化T细胞细胞周期(72 h).NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L-1与活化T细胞作用24或48 h,用ELISA测定培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、IL-17A和干扰素γ(IFN-γ)水平.结果 NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L-1抑制抗CD3/CD28抗体活化的T细胞增殖,IC50为(0.28±0.04)μmol·L-1,且与静息T细胞作用96 h无显著细胞毒性.NMHC显著抑制CD25表达,具有浓度效应关系(r=-0.980,P<0.05).NMHC 2和8μmol·L-1作用72 h可调节细胞周期,G0/G1期细胞增加(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05),具有浓度-效应关系(r=0.920,P<0.05);细胞上清液中IL-2,IL-6,IL-17A和IFN-γ水平显著降低(P<0.05).结论 NMHC可抑制T细胞活化标志分子CD25的表达和IL-2的分泌,阻滞细胞周期于G0/G1期,同时抑制炎性细胞因子IL-6,IL-17A和IFN-γ的分泌,这可能是其抑制T细胞增殖的作用机制之一.
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