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[摘要] 目的 观察炙马钱子对实验性兔脊髓损伤（SCI） 模型Tarlov评分的影响，探讨治疗脊髓损伤的新方法。 方法 18只兔造模成功，随机均分为对照组、低剂量组、高剂量组。低剂量组每天喂服两次马钱子胶囊，每次40mg；高剂量组每次80mg。对照组给予淀粉颗粒。各组动物分别于造模后6h、24h、3d、1周、2周、3周6个时间点进行下肢Tarlov评分。 结果 低剂量组在治疗2周后Tarlov评分（1.67±0.5）较对照组（0.67±0.8）升高（P ＜0.05），3周后Tarlov评分（2.00±0.6）与对照组相（0.50±0.8）比差异有显著性意义（P＜0.01）；在高剂量组，在治疗1周后Tarlov评分（1.66±0.5）与对照组相比（0.83±0.7）差异有统计学意义（P＜0.05），2周评分（2.17±0.7）和3周评分（3.00±0.6）与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）；且3周后，高剂量组与低剂量组相比也有统计学意义（P＜0.05）。 结论 大剂量炙马钱子对脊髓损伤有治疗作用。
[关键词] 马钱子；脊髓损伤
[中图分类号] R651.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）09-69-03
The Tarlov scores on treatment of spinal cord injury by grilled nux vomica
ZHANG Qin1 YANG Kepeng2 HOU Qun3 WEI Xinxia1 WEI Dandan1
1.Department of Neurology, Yellow River Central Hospital, Zhengzhou 450003, China; 2. Department of Rheumatology, the TCM Hospital of Zhengzhou City, Zhengzhou 450007, China; 3. Department of Neurology, the TCM Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310053, China
[Abstract] Objective To observe the effect of nux vomica on the Tarlov scores of the experimental rabbit spinal cord injury (SCI) model, and explore the therapeutic effect of grilled nux vomica on SCI. Methods 18 of which were successful. Then were randomly and equally divided into the control group, low-does group and high-does group. The low-does group were given the nux vomica capsule twice a day, and 40mg for each time; The high-dose group were given 80mg for each time. The course of treatment last three weeks, at the same time, the control group were given the starch capsule. All groups were evaluated by Tarlov score at pre-operation and 3hours, 24hours, 3days, 1weeks, 2weeks, 3weeks after operation. Results After treating 2 weeks, the Tarlov scores of the low-dose group(1.67±0.5) was increased, compared with the control group(0.67±0.8) (P＜0.05); After 3 week, the Tarlov scores(2.00±0.6) was higher than the control group (P＜0.01); In the high-does group, the Tarlov score was higher after 1 weeks (1.66±0.5) than the control group (0.83±0.7) (P＜0.05), the Tarlov scores was significant difference after treating for 2 weeks and 3 weeks (P＜0.01); and after 3weeks, the high-dose group (3.00±0.6)was higher than the low-dose group(2.00±0.6)( P＜0.05). Conclusion High-does grilled nux vomica play a therapeutic role in SCI.
[Key words] Grilled nux vomica; Spinal cord injury
脊髓损伤（spinal cord injure，SCI）是临床上一种致残率很高的疾病，虽然其病死率从20年代的50%左右降低到目前的6%左右 [1]，但神经损伤的恢复程度仍較差，如何对其进行恰当的治疗仍然是神经科学领域中一个极具挑战性的课题。本研究将进行一些有益的探讨。
1 主要实验设施、仪器、试剂与材料
本实验依托浙江中医药大学动物实验中心和浙江省中医院脑病研究室完成。主要仪器有Allen打击器（自制）、枪式咬骨钳。实验药物为马钱子胶囊（浙江省中医院药剂室制备） 、3%戊巴比妥（华东医药公司生产）。实验动物为3月龄普通级健康日本大耳白兔21只，雌雄不拘，体重（2.25±0.25）kg， 浙江中医药大学实验动物中心提供。
2 方法
2.1 SCI模型的制备
用3月龄普通级日本大耳白兔21只，用3%的戊巴比妥按每公斤体重30mg的剂量耳缘静脉注
表1 各组Tarlov评分变化比较 （）
组别 术后24h 术后3d 第1周 第2周 第3周
对照组 0.17±0.8 0.83±0.4 0.83±0.7 0.67±0.8 0.50±0.8
低剂量组 1.00±1.1 1.00±0.6 1.50±0.5 1.67±0.5＊ 2.00±0.6▲
高剂量组 0.83±0.7 1.50±0.5 1.66±0.5＊ 2.17±0.7▲ 3.00±0.6▲★
注：与对照组相比较，＊P ＜0.05；与对照组相比较，▲P＜0.01；与低剂量组第3周比较，★P＜0.01
射，麻醉动物。以T12肋为标志，在无菌条件下取正中切口长约4cm，逐层切开，分离肌肉，显露椎板，枪式咬骨钳咬除T12～T11棘突及相应椎板，暴露硬脊膜0.6cm×0.6cm，以改良Allen法用自制打击器，以120g·cm打击局部。打击后，兔尾巴痉挛性摆动，双下肢及躯体回缩样扑动，双下肢呈痉挛性瘫痪标志打击成功。
2.2 分组与给药
在实验过程中有3只兔子因严重的排尿不畅及感染而死亡。其余18只造模成功的日本大耳白兔随机平分成对照组、低剂量组和高剂量组。根据动物与人药物剂量的换算法确定给药剂量[4]。动物造模后第2天开始喂药，高剂量组每次喂服80mg炙马钱子，每天两次；低剂量组每次喂服40mg，每天两次。对照组喂给等量的淀粉颗粒。疗程3周。
2.3 检测指标
下肢运动功能评定：采用改良Tarlov分级方法[2]评定。由两名熟知Tarlov评分方法的非本组实验人员进行评定，取平均值。各组动物分别于造模后6h、24h、3d、1周、2周、3周观察兔的下肢肌力，进行评分。
2.4 统计学方法
所有数据均用SPSS16.0软件进行统计分析。计量资料均以（）表示；多组均数间比较用方差分析，其中两组间比较用q检验；两组间均数比较用t检验或t'检验。
3 结果
各组动物造模前评分均为5分，造摸动物苏醒后即刻及第6小时均为0分。低剂量组3d后大多数动物肌力开始有所恢复，评分为（1.0±1.1）分；术后1周肌力恢复较前明显，但不能负重，评分为（1.5±0.5）分；术后3周评分为（1.7±0.5）分，与对照组相比较差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组动物在3d时也有较明显的恢复，但与对照组相比较差异无统计学意义，但1周后与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）；3周后与对照组相比较差异有极显著性意义（P＜0.01），与低剂量组相比较恢复也较明显（P＜0.05）。同组内，高剂量、低剂量组1周、3周相比恢复不明显（P＞0.05）。见表1。
4 讨论
国内外学者对脊髓损伤的机制已进行了大量的研究，目前的研究结果表明神经损伤的继发性损害因素具有可逆性且可被控制[3]。本实验选用经典的脊髓撞击伤实验模型，实验的结果也表明，此能量的打击造模成功的几率较高[4]。马钱子最早记载于《本草纲目》：其性味苦寒，无毒，归肝、脾经，散结消肿，通络止痛。综合其临床应用及现代药理研究来看，马钱子具有活血通经活络之功能，并能激活神经细胞，增强细胞代谢的作用，进而达到营养神经，消除损伤的功效[5]。
马钱子生品、沙烫品及醋煮品马钱子的毒力存在差异，以醋煮品的毒性较低[6-7]。秋超等[8]研究认为联合炙马钱子治疗脊髓损伤效果优于基础治疗。周红英等[9]研究认为马钱子通过减少损伤脊髓局部NO、c-fos蛋白的表达、下调Bax/Bcl-2比值从而抑制细胞凋亡，阻止脊髓继发性损伤，促进脊髓损伤后神经功能的恢复。朱太咏等[10]观察中药对神经再生的作用，发现马钱子组在浓度为0.025%以下时，与空白组比较，神经纤维增长（P＜0.05）；浓度为0.05%以上时，与空白组比较，神经纤维缩短（P＜0.05）。认为马钱子在适宜浓度下对神经再生具有促进作用。谢思健等[11]综述归纳得出马钱子在脊髓损伤方面具有较满意疗效。钱铭净等[12]研究发现炙马钱子及高压氧对兔脊髓损伤有一定的治疗作用，且两者联合治疗的疗效优于单独使用。
本实验的研究显示：炙马钱子低剂量组兔脊髓神经功能Tarlov评分在术后2周与空白对照组相比较具差异有显著性（P＜0.05），3周比较更为明显（P＜0.01）；高剂量组在术后3d与对照组相比较即有统计学意义（P＜0.05），3周与低剂量组相比较也具有统计学意义（P＜0.05）。表明一定剂量的马钱子能促进SCEP兔后肢运动功能的恢复，且大剂量马钱子治疗SCI效果较小剂量时效果更为明显。从本实验的结果来看，炙马钱子能显著改善脊髓神经功能的评分，且在一定范围内，大剂量的炙马钱子对脊髓损伤的修复明显优于低剂量的治疗。
[参考文献]
[1] 王维治.神经病学[M].北京：人民卫生出版社，2013：1267.
[2] 陈主初，吴端生.实验动物学[M].长沙：湖南科学技术出版社，2003：88.
[3] Wang CX，Nuttin BJ，Gybels JM.Motor evoked potentials in a static load model of spinal cord injury in the rat[J].Neurosurgey，1993，32920：269-273.
[4] 董刚，侯群，裘昌林.馬钱子在神经系统疾病中的应用[J].浙江中西医结合杂志，2004，14（12）：791-792.
[5] 杨俊峰，顾晓林，王建伟.中医药治疗脊髓损伤的研究进展[J].中国中西医结合杂志，2013，33（10）：1431-1433.
[6] 王淑静，娄玉钤.配伍对马钱子的减毒增效研究概述[J].风湿病与关节炎，2014（2）：78-80.
[7] 王娜，许海江，孙同文，等.生品、沙烫品及醋煮品马钱子的急性毒性试验[J].中医临床研究，2013（4）：25-26.
[8] 秋超，侯群，戚观树，等.炙马钱子治疗脊髓损伤45例临床观察[J].中国中医药科技，2012，19（6）：530-531.
[9] 周红英，侯群，戚观树，等.马钱子抑制兔脊髓损伤的细胞凋亡作用[J].中国临床药理学与治疗学，2010，15（8）：880-885.
[10] 朱太咏，赵翠萍.中药促进神经再生的实验研究[J].世界中西医结合杂志，2006，1（2）：85-90.
[11] 谢思健，俞亮，康怡，等.马钱子在神经系统疾病中的应用[J].中国医药指南，2013（10）：463.
[12] 钱铭净，侯群，裴君，等.炙马钱子与高压氧联合治疗兔脊髓损伤的实验研究[J].中国中医药科技，2009，16（3）：182-183.
（收稿日期：2014-03-20）
[关键词] 马钱子；脊髓损伤
[中图分类号] R651.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）09-69-03
The Tarlov scores on treatment of spinal cord injury by grilled nux vomica
ZHANG Qin1 YANG Kepeng2 HOU Qun3 WEI Xinxia1 WEI Dandan1
1.Department of Neurology, Yellow River Central Hospital, Zhengzhou 450003, China; 2. Department of Rheumatology, the TCM Hospital of Zhengzhou City, Zhengzhou 450007, China; 3. Department of Neurology, the TCM Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310053, China
[Abstract] Objective To observe the effect of nux vomica on the Tarlov scores of the experimental rabbit spinal cord injury (SCI) model, and explore the therapeutic effect of grilled nux vomica on SCI. Methods 18 of which were successful. Then were randomly and equally divided into the control group, low-does group and high-does group. The low-does group were given the nux vomica capsule twice a day, and 40mg for each time; The high-dose group were given 80mg for each time. The course of treatment last three weeks, at the same time, the control group were given the starch capsule. All groups were evaluated by Tarlov score at pre-operation and 3hours, 24hours, 3days, 1weeks, 2weeks, 3weeks after operation. Results After treating 2 weeks, the Tarlov scores of the low-dose group(1.67±0.5) was increased, compared with the control group(0.67±0.8) (P＜0.05); After 3 week, the Tarlov scores(2.00±0.6) was higher than the control group (P＜0.01); In the high-does group, the Tarlov score was higher after 1 weeks (1.66±0.5) than the control group (0.83±0.7) (P＜0.05), the Tarlov scores was significant difference after treating for 2 weeks and 3 weeks (P＜0.01); and after 3weeks, the high-dose group (3.00±0.6)was higher than the low-dose group(2.00±0.6)( P＜0.05). Conclusion High-does grilled nux vomica play a therapeutic role in SCI.
[Key words] Grilled nux vomica; Spinal cord injury
脊髓损伤（spinal cord injure，SCI）是临床上一种致残率很高的疾病，虽然其病死率从20年代的50%左右降低到目前的6%左右 [1]，但神经损伤的恢复程度仍較差，如何对其进行恰当的治疗仍然是神经科学领域中一个极具挑战性的课题。本研究将进行一些有益的探讨。
1 主要实验设施、仪器、试剂与材料
本实验依托浙江中医药大学动物实验中心和浙江省中医院脑病研究室完成。主要仪器有Allen打击器（自制）、枪式咬骨钳。实验药物为马钱子胶囊（浙江省中医院药剂室制备） 、3%戊巴比妥（华东医药公司生产）。实验动物为3月龄普通级健康日本大耳白兔21只，雌雄不拘，体重（2.25±0.25）kg， 浙江中医药大学实验动物中心提供。
2 方法
2.1 SCI模型的制备
用3月龄普通级日本大耳白兔21只，用3%的戊巴比妥按每公斤体重30mg的剂量耳缘静脉注
表1 各组Tarlov评分变化比较 （）
组别 术后24h 术后3d 第1周 第2周 第3周
对照组 0.17±0.8 0.83±0.4 0.83±0.7 0.67±0.8 0.50±0.8
低剂量组 1.00±1.1 1.00±0.6 1.50±0.5 1.67±0.5＊ 2.00±0.6▲
高剂量组 0.83±0.7 1.50±0.5 1.66±0.5＊ 2.17±0.7▲ 3.00±0.6▲★
注：与对照组相比较，＊P ＜0.05；与对照组相比较，▲P＜0.01；与低剂量组第3周比较，★P＜0.01
射，麻醉动物。以T12肋为标志，在无菌条件下取正中切口长约4cm，逐层切开，分离肌肉，显露椎板，枪式咬骨钳咬除T12～T11棘突及相应椎板，暴露硬脊膜0.6cm×0.6cm，以改良Allen法用自制打击器，以120g·cm打击局部。打击后，兔尾巴痉挛性摆动，双下肢及躯体回缩样扑动，双下肢呈痉挛性瘫痪标志打击成功。
2.2 分组与给药
在实验过程中有3只兔子因严重的排尿不畅及感染而死亡。其余18只造模成功的日本大耳白兔随机平分成对照组、低剂量组和高剂量组。根据动物与人药物剂量的换算法确定给药剂量[4]。动物造模后第2天开始喂药，高剂量组每次喂服80mg炙马钱子，每天两次；低剂量组每次喂服40mg，每天两次。对照组喂给等量的淀粉颗粒。疗程3周。
2.3 检测指标
下肢运动功能评定：采用改良Tarlov分级方法[2]评定。由两名熟知Tarlov评分方法的非本组实验人员进行评定，取平均值。各组动物分别于造模后6h、24h、3d、1周、2周、3周观察兔的下肢肌力，进行评分。
2.4 统计学方法
所有数据均用SPSS16.0软件进行统计分析。计量资料均以（）表示；多组均数间比较用方差分析，其中两组间比较用q检验；两组间均数比较用t检验或t'检验。
3 结果
各组动物造模前评分均为5分，造摸动物苏醒后即刻及第6小时均为0分。低剂量组3d后大多数动物肌力开始有所恢复，评分为（1.0±1.1）分；术后1周肌力恢复较前明显，但不能负重，评分为（1.5±0.5）分；术后3周评分为（1.7±0.5）分，与对照组相比较差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组动物在3d时也有较明显的恢复，但与对照组相比较差异无统计学意义，但1周后与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）；3周后与对照组相比较差异有极显著性意义（P＜0.01），与低剂量组相比较恢复也较明显（P＜0.05）。同组内，高剂量、低剂量组1周、3周相比恢复不明显（P＞0.05）。见表1。
4 讨论
国内外学者对脊髓损伤的机制已进行了大量的研究，目前的研究结果表明神经损伤的继发性损害因素具有可逆性且可被控制[3]。本实验选用经典的脊髓撞击伤实验模型，实验的结果也表明，此能量的打击造模成功的几率较高[4]。马钱子最早记载于《本草纲目》：其性味苦寒，无毒，归肝、脾经，散结消肿，通络止痛。综合其临床应用及现代药理研究来看，马钱子具有活血通经活络之功能，并能激活神经细胞，增强细胞代谢的作用，进而达到营养神经，消除损伤的功效[5]。
马钱子生品、沙烫品及醋煮品马钱子的毒力存在差异，以醋煮品的毒性较低[6-7]。秋超等[8]研究认为联合炙马钱子治疗脊髓损伤效果优于基础治疗。周红英等[9]研究认为马钱子通过减少损伤脊髓局部NO、c-fos蛋白的表达、下调Bax/Bcl-2比值从而抑制细胞凋亡，阻止脊髓继发性损伤，促进脊髓损伤后神经功能的恢复。朱太咏等[10]观察中药对神经再生的作用，发现马钱子组在浓度为0.025%以下时，与空白组比较，神经纤维增长（P＜0.05）；浓度为0.05%以上时，与空白组比较，神经纤维缩短（P＜0.05）。认为马钱子在适宜浓度下对神经再生具有促进作用。谢思健等[11]综述归纳得出马钱子在脊髓损伤方面具有较满意疗效。钱铭净等[12]研究发现炙马钱子及高压氧对兔脊髓损伤有一定的治疗作用，且两者联合治疗的疗效优于单独使用。
本实验的研究显示：炙马钱子低剂量组兔脊髓神经功能Tarlov评分在术后2周与空白对照组相比较具差异有显著性（P＜0.05），3周比较更为明显（P＜0.01）；高剂量组在术后3d与对照组相比较即有统计学意义（P＜0.05），3周与低剂量组相比较也具有统计学意义（P＜0.05）。表明一定剂量的马钱子能促进SCEP兔后肢运动功能的恢复，且大剂量马钱子治疗SCI效果较小剂量时效果更为明显。从本实验的结果来看，炙马钱子能显著改善脊髓神经功能的评分，且在一定范围内，大剂量的炙马钱子对脊髓损伤的修复明显优于低剂量的治疗。
[参考文献]
[1] 王维治.神经病学[M].北京：人民卫生出版社，2013：1267.
[2] 陈主初，吴端生.实验动物学[M].长沙：湖南科学技术出版社，2003：88.
[3] Wang CX，Nuttin BJ，Gybels JM.Motor evoked potentials in a static load model of spinal cord injury in the rat[J].Neurosurgey，1993，32920：269-273.
[4] 董刚，侯群，裘昌林.馬钱子在神经系统疾病中的应用[J].浙江中西医结合杂志，2004，14（12）：791-792.
[5] 杨俊峰，顾晓林，王建伟.中医药治疗脊髓损伤的研究进展[J].中国中西医结合杂志，2013，33（10）：1431-1433.
[6] 王淑静，娄玉钤.配伍对马钱子的减毒增效研究概述[J].风湿病与关节炎，2014（2）：78-80.
[7] 王娜，许海江，孙同文，等.生品、沙烫品及醋煮品马钱子的急性毒性试验[J].中医临床研究，2013（4）：25-26.
[8] 秋超，侯群，戚观树，等.炙马钱子治疗脊髓损伤45例临床观察[J].中国中医药科技，2012，19（6）：530-531.
[9] 周红英，侯群，戚观树，等.马钱子抑制兔脊髓损伤的细胞凋亡作用[J].中国临床药理学与治疗学，2010，15（8）：880-885.
[10] 朱太咏，赵翠萍.中药促进神经再生的实验研究[J].世界中西医结合杂志，2006，1（2）：85-90.
[11] 谢思健，俞亮，康怡，等.马钱子在神经系统疾病中的应用[J].中国医药指南，2013（10）：463.
[12] 钱铭净，侯群，裴君，等.炙马钱子与高压氧联合治疗兔脊髓损伤的实验研究[J].中国中医药科技，2009，16（3）：182-183.
（收稿日期：2014-03-20）