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摘 要：目的：建立一个用高效液相色谱法测定化妆品中苯酚含量的方法。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）;流动相：甲醇+水（58+42）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：25℃;进样量：5μ。结果：精密度试验、准确度试验测试结果均能满足要求，质控结果满意。结论：该方法简便、准确，可用于化妆品中苯酚的质量控制。
关键词：化妆品;苯酚;紫外检测器;方法确认
根据《化妆品安全技术规范》（2015年版）中苯酚的测定，通过HPLC进行测定，对苯酚的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系與线性范围考察、准确度试验（加样回收试验）的验证，确保检验方法对被检物质有足够的专属性和灵敏度，通过回收率试验验证检验过程的回收率，并确定苯酚的线性范围、定量限，用以确定HPLC法在本实验室的适用性及可控性。
一、概述
根据CNAS-CL10《检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明》中5.4“检测和校准方法及方法的确认”的规定：“实验室应对首次采用的检测方法进行技术能力的验证”，检验方法学的验证是保证检验结果准确可靠的关键因素。
二、验证内容
1.仪器与材料
1.1 样品：中药祛斑膏 TZH18000458。
1.2 方法选择
《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，采用直接法，通过HPLC测定中药祛斑膏中的苯酚的含量。
1.3 仪器及试药
1.3.1高效液相色谱仪：Agilent 1260（紫外检测器）。
1.3.2色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）。
1.3.3试剂：甲醇 色谱级 德国默克 I0945607 812;苯酚对照品批号50804 含量以99.9%计。
1.3.4天平：赛多利斯电子天平（CPA225D）;
1.3.5超声波清洗机
2.试验方法 《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，具体内容如下：
2.1 色谱条件 色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）;流动相：甲醇+水（58+42）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：25℃;进样量：5μ。
2.2 苯酚标准储备液的制备 准确称苯酚标准品0.1077g，用甲醇溶解后转移至100ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。此溶液甲醇含量为107.5923mg/100ml。
2.3标准工作溶液的制备 取标准储备液1、5、10、20ml于100ml容量瓶中，用甲醇定容，配制成浓度为10mg/L，50mg/L，100mg/L，200mg/L的标准工作溶液。
2.4 供试品溶液的制备 称取1g样品（精确至0.001g），于50mL容量瓶中，加甲醇定容，常温超声提取15min，4000rpm离心10min，精密移取上清液5ml于50ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，0.45μm滤膜过滤后待测。
2.5测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入色谱仪，测定，即得。
3.验证项目
3.1系统适用性试验
称取供试品1.0725g，1.0810按供试品溶液的制备，制得供试品溶液;取2.4项下的的标准溶液作为对照品溶液，按照上述色谱条件测定。
测试结果表明：在本实验室内该方法系统适用性能够满足要求。
3.2 精密度试验
分别精密吸取2.4项下标准工作溶液浓度为200mg/L，按测定方法重复进样6次，测定峰面积值。对各次测得的峰面积值求相对标准偏差值，用以说明仪器精密度情况。
峰面积分别为735.11847;728.36633;731.68073;731.38043;732.82886;729.76147，相对标准偏差值RSD为0.003%，≤2%，说明仪器精密度良好。
3.3 线性关系与线性范围考察
按照2.2所述配制苯酚标准储备液，浓度苯酚为1.075923mg/ml，分别按照0.5→100ml、1mL→100mL、5mL→100mL、10mL→100mL、20mL→100mL溶液稀释成标准工作溶液。分别取该工作溶液5μL注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标作线性回归，绘制标准曲线。
三、结论
根据《化妆品安全技术规范》（2015年版）中苯酚的测定，通过HPLC进行测定，对苯酚的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、线性关系与线性范围考察、检测限、定量限、准确度试验（加样回收试验），各项试验测试结果均能满足要求，仪器性能稳定，试验结果满意。从以上数据可以看出用该方法检测化妆品中的苯酚的含量，结果准确可靠，可以在本实验室运用此方法检测化妆品中的苯酚的含量。
该方法中苯酚的方法检出限为2.5mg/g，定量限为5mg/g，苯酚的线性范围为0.00005379615mg/ml～0.00215184600mg/ml。
参考文献
[1]《化妆品安全技术规范》（2015年版）
[2]国家药典委员会，中华人民共和国药典 2015版[M].四部.北京：中国医药科技出版社，2015：374-377.
关键词：化妆品;苯酚;紫外检测器;方法确认
根据《化妆品安全技术规范》（2015年版）中苯酚的测定，通过HPLC进行测定，对苯酚的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系與线性范围考察、准确度试验（加样回收试验）的验证，确保检验方法对被检物质有足够的专属性和灵敏度，通过回收率试验验证检验过程的回收率，并确定苯酚的线性范围、定量限，用以确定HPLC法在本实验室的适用性及可控性。
一、概述
根据CNAS-CL10《检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明》中5.4“检测和校准方法及方法的确认”的规定：“实验室应对首次采用的检测方法进行技术能力的验证”，检验方法学的验证是保证检验结果准确可靠的关键因素。
二、验证内容
1.仪器与材料
1.1 样品：中药祛斑膏 TZH18000458。
1.2 方法选择
《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，采用直接法，通过HPLC测定中药祛斑膏中的苯酚的含量。
1.3 仪器及试药
1.3.1高效液相色谱仪：Agilent 1260（紫外检测器）。
1.3.2色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）。
1.3.3试剂：甲醇 色谱级 德国默克 I0945607 812;苯酚对照品批号50804 含量以99.9%计。
1.3.4天平：赛多利斯电子天平（CPA225D）;
1.3.5超声波清洗机
2.试验方法 《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，具体内容如下：
2.1 色谱条件 色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）;流动相：甲醇+水（58+42）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：25℃;进样量：5μ。
2.2 苯酚标准储备液的制备 准确称苯酚标准品0.1077g，用甲醇溶解后转移至100ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。此溶液甲醇含量为107.5923mg/100ml。
2.3标准工作溶液的制备 取标准储备液1、5、10、20ml于100ml容量瓶中，用甲醇定容，配制成浓度为10mg/L，50mg/L，100mg/L，200mg/L的标准工作溶液。
2.4 供试品溶液的制备 称取1g样品（精确至0.001g），于50mL容量瓶中，加甲醇定容，常温超声提取15min，4000rpm离心10min，精密移取上清液5ml于50ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，0.45μm滤膜过滤后待测。
2.5测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入色谱仪，测定，即得。
3.验证项目
3.1系统适用性试验
称取供试品1.0725g，1.0810按供试品溶液的制备，制得供试品溶液;取2.4项下的的标准溶液作为对照品溶液，按照上述色谱条件测定。
测试结果表明：在本实验室内该方法系统适用性能够满足要求。
3.2 精密度试验
分别精密吸取2.4项下标准工作溶液浓度为200mg/L，按测定方法重复进样6次，测定峰面积值。对各次测得的峰面积值求相对标准偏差值，用以说明仪器精密度情况。
峰面积分别为735.11847;728.36633;731.68073;731.38043;732.82886;729.76147，相对标准偏差值RSD为0.003%，≤2%，说明仪器精密度良好。
3.3 线性关系与线性范围考察
按照2.2所述配制苯酚标准储备液，浓度苯酚为1.075923mg/ml，分别按照0.5→100ml、1mL→100mL、5mL→100mL、10mL→100mL、20mL→100mL溶液稀释成标准工作溶液。分别取该工作溶液5μL注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标作线性回归，绘制标准曲线。
三、结论
根据《化妆品安全技术规范》（2015年版）中苯酚的测定，通过HPLC进行测定，对苯酚的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、线性关系与线性范围考察、检测限、定量限、准确度试验（加样回收试验），各项试验测试结果均能满足要求，仪器性能稳定，试验结果满意。从以上数据可以看出用该方法检测化妆品中的苯酚的含量，结果准确可靠，可以在本实验室运用此方法检测化妆品中的苯酚的含量。
该方法中苯酚的方法检出限为2.5mg/g，定量限为5mg/g，苯酚的线性范围为0.00005379615mg/ml～0.00215184600mg/ml。
参考文献
[1]《化妆品安全技术规范》（2015年版）
[2]国家药典委员会，中华人民共和国药典 2015版[M].四部.北京：中国医药科技出版社，2015：374-377.