反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株耐药性的实验研究

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目的 采用一段人工合成的互补于多药耐药基因(mdr1基因)的反义硫代磷酸寡核苷酸(AS-SODN,反义核酸)转染白血病多药耐药细胞株K562/ADM(耐阿霉素的K562细胞株),来逆转白血病细胞的多药耐药。方法 四唑蓝快速比色法(MTT法)检测K562/ADM细胞对阿霉素的半数抑制量(IC50),流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量,免疫细胞化学染色方法确定P170的表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mdr1-mRNA的相对水平(mdr1与β2微球蛋白之比,mdr12-MG)。结果 浓度为2μmol/L的反义核酸使K562/ADM细胞对阿霉素的IC50从处理前的25.72mg/L降至处理后的6.97mg/L,相对逆转效率为73.01%。反义核酸亦使K562/ADM细胞内的柔红霉素含量增加。P170表达阳性率从处理前的(98.26±1.35)%降至处理后的(18.3±6.5)%,mdr12-MG亦由处理前的2.07±0.16降至1.57±0.14,mdr1-mRNA相对水平有所下降。结论 反义核酸通过下调mdr1基因,阻断P170的表达,从而降低K562/ADM的耐药性。

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