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采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法分离铁胁迫玉米根总RNA,然后采用寡聚dT纤维素层析柱法纯化Poly(A)^+RNA。用含有XhoI位点的linker-primer锚定合成cDNA第一条链后,采用替代法合成第二条链,接着连接上EcoRI Adapter以便定向重组到载体上。cDNA经过XhoI消化和分级分离后,带有XhoI和EcoRI粘性末端的cDNA定向重组到λZAP表达载体的XhoI和EcoRI位点上。经体外包装,重组的噬菌体转导宿主菌XL1-Blue MRF,最终获得滴度为4.5×10^5p