【摘 要】
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为了深入分析抗冻蛋白基因ISP-Ⅱ在鱼类抗逆生理过程中的作用,探究人工配合饲料对大口黑鲈生理变化和基因表达水平的影响,本研究克隆并分析了大口黑鲈ISP-Ⅱ cDNA序列,同时分
【机 构】
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中国水产科学研究院,珠江水产研究所,农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广州,510380
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为了深入分析抗冻蛋白基因ISP-Ⅱ在鱼类抗逆生理过程中的作用,探究人工配合饲料对大口黑鲈生理变化和基因表达水平的影响,本研究克隆并分析了大口黑鲈ISP-Ⅱ cDNA序列,同时分别用冰鲜鱼和人工配合饲料投喂大口黑鲈,利用荧光定量PCR (qRT-PCR)的方法分析两组鱼ISP-ⅡmRNA在组织中的表达量.结果 获得大口黑鲈ISP-Ⅱ cDNA序列838 bp,其中开放阅读框为522 bp,编码的蛋白共173个氨基酸;氨基酸序列分析结果表明,ISP蛋白具有保守的C型凝集素结构域,四对二硫键,推测为C型凝集素进化而来的Ca2+依赖亚型抗冻蛋白.其氨基酸序列与其它物种ISP-Ⅱ序列同源性较低,其中与深裂眶锯雀鲷(Stegastes partitus)同源性最高,仅为65.50％.qRT-PCR结果表明,在对照组大口黑鲈(喂食冰鲜鱼组)组织中ISP-Ⅱ mRNA在脾中表达最高,并在肝、肠、幽门垂、胃、脑、性腺、心脏、肾脏、肌肉、眼和鳃组织中均有表达.在检测实验组大口黑鲈(喂人工配合饲料组)组织中检测到ISP-Ⅱ mRNA在肝、肠、胃和肌肉的表达量显著较冰鲜鱼组高.上述结果表明,人工配合饲料能让肉食性的大口黑鲈产生类似冰冻的条件下的应激反应,上调了ISP-Ⅱ的表达,以应对不利环境、保护生物体,使机体适应不利因素.本研究为进一步研究大口黑鲈的食性驯化机制与ISP-Ⅱ在体内的功能提供了科学依据.
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