枯草芽孢杆菌寡聚—1，6—葡萄糖苷酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作 者: 蒋思婧 马立新
• 机 构: 湖北大学生命科学院分子微生物与基因工程研究所
• 出 处: 微生物学报
• 发表日期: 2002年2期
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 寡聚-1 6-葡萄糖苷酶 鸟枪法克隆 基因表达 Bacillus subtilis Oligo-1 6-glucosidase Gene cl
• 基金项目: 国家自然科学基金资助 ( 3990 0 0 0 3)~~

本研究用鸟枪法构建了枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)HB002的基因组文库，经平板法筛选得到了六株能水解合成底物对－硝基苯－α-D－葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆，经鉴定均含克隆了寡聚－1，6－葡萄糖苷酶基因的重组质粒（命名为pHBM001-pHBM006)。选择pHBM003,对其插入片段测序分析，此片段内有一编码561个氨基酸的开放阅读框，该 蛋白质的计算分子量为65.985kD。HB002的寡聚－1，6－葡萄糖苷酶的氨基酸序列与Bacillus sp.和凝结芽孢杆菌（Bacillus c